大鼠精原原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：人原代腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞 KU812(人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞) MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞 1ml/T75 NCI-H157 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 HCT 116 人結(jié)腸癌細(xì)胞 小鼠原代肝枯否細(xì)胞

大鼠精原原代細(xì)胞

大鼠精原細(xì)胞分離自睪丸組織；睪丸呈微扁的卵圓形，表面光滑，覆蓋著鞘膜臟層；深部是質(zhì)地堅(jiān)韌的白膜，在睪丸后緣增厚并進(jìn)入睪丸，形成睪丸縱膈，縱膈發(fā)出許多睪丸小隔深入睪丸實(shí)質(zhì)，將實(shí)質(zhì)分為睪丸小葉，數(shù)量約為100～200。每個(gè)小葉內(nèi)約有2～4條生精小管，具有產(chǎn)生精子的作用；生精小管之間的結(jié)締組織中有睪丸間質(zhì)細(xì)胞，具有產(chǎn)生雄激素的作用。生精小管首先匯合成為精直小管(也稱直精小管)，精直小管進(jìn)入睪丸縱膈形成睪丸網(wǎng)，之后睪丸網(wǎng)發(fā)出12～15條輸出小管通過睪丸后上緣進(jìn)入附睪。生精小管的生精上皮是精子產(chǎn)生的地方，由生精細(xì)胞和支持細(xì)胞構(gòu)成，成人的生精小管有30～70cm長(zhǎng)。精子的產(chǎn)生過程包括生精細(xì)胞的分化、支持細(xì)胞的作用、雄激素的調(diào)節(jié)等。生精細(xì)胞并不是一種細(xì)胞，它是多種細(xì)胞的統(tǒng)稱，包括精原細(xì)胞、初級(jí)精母細(xì)胞、次級(jí)精母細(xì)胞、精子細(xì)胞、精子。前者依次發(fā)育分化為后者，且依次從生精上皮的基部到管腔面排列，最終形成精子進(jìn)入到管腔之中，并借助生精上皮外側(cè)的肌樣細(xì)胞的收縮作用向下一級(jí)管腔移動(dòng)。精原細(xì)胞是指由睪丸精子管上皮的原始生殖細(xì)胞經(jīng)過多次有絲分裂而形成的細(xì)胞。原始的胚細(xì)胞經(jīng)分化形成精原細(xì)胞，精原細(xì)胞經(jīng)復(fù)制形成初級(jí)精母細(xì)胞，初級(jí)精母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)第一次分裂后形成次級(jí)精母細(xì)胞，再經(jīng)過減數(shù)第二次分裂形成精細(xì)胞。精細(xì)胞經(jīng)過變形最終形成精子。精原細(xì)胞屬于雄性生殖細(xì)胞的早期發(fā)育階段，能不斷地進(jìn)行有絲分裂，增加細(xì)胞數(shù)量，并分化為精母細(xì)胞。精原細(xì)胞貼近基膜，細(xì)胞呈圓形，核大而圓，梁色深。精原細(xì)胞在男性的一生中具有幾乎無限分裂的能力，而且分裂過程中能夠保持原有的基因性狀不變。在增殖過程中，通過精原細(xì)胞的分裂和分化，由精原細(xì)胞產(chǎn)生精母細(xì)胞，進(jìn)入成熟分裂，因而通過增殖可大大增加精母細(xì)胞的數(shù)量。按理論推算，一個(gè)精原細(xì)胞通過數(shù)次細(xì)胞分裂，可形成上百個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞。但在生精過程早期，生精細(xì)胞很易發(fā)生變性，故實(shí)際上少于這個(gè)數(shù)字。在精原細(xì)胞的增殖過程中，有一部分Ad型精原細(xì)胞不再繼續(xù)分裂，而是保留下來，成為新的精原干細(xì)胞，因此通過增殖不僅能使精原干細(xì)胞不斷得到更新，且能使精原干細(xì)胞保持一定數(shù)量，從而使精子的產(chǎn)生持續(xù)地進(jìn)行下去，不會(huì)枯竭。

產(chǎn)品名稱：大鼠精原細(xì)胞

組織來源：睪丸

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、GDNF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：圓形、橢圓形

傳代特性：可傳2-3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠精原細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡(jiǎn)介

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠精原采用混合酶多步消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠精原經(jīng)AP(堿性磷酸酶)免疫組化染色鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒

Rat angiogenin (ANG) ELISA Kit 大鼠血管生長(zhǎng)素(ANG)試劑盒

Humanadrenalcoexaibody,ACAELISAKit 人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMW試劑盒人高分子量細(xì)胞角蛋白(CK-HMW)試劑盒

組織HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒定性試劑盒20次

Humanplateletbasicprotein,PBPELISAKit人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)試劑盒

豬白介素1α(IL-1α)ELISA 試劑盒

Human ai Q thermal aibody (ai-Q-Ab) ELISA Kit 人抗Q熱抗體(ai-Q-Ab)試劑盒

PorcineIerleukin1,IL-1ELISAKit 豬白介素1(IL-1)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAKA(HumanAi-keratinaibody)ELISAKit人抗角蛋白抗體

血液尿酸含量酶偶聯(lián)比色法定量試劑盒20次

MouseUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISAKit小鼠高敏三甲狀腺原(u-T3)試劑盒

人抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit   ELISA. 

人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISAKit   ELISA. 

人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISAKit   ELISA.

CLMP重組大鼠 ASAM / CLMP 蛋白 Protein

GFRA4 ( Persephin receptor 0.5mgGFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)

SORCS1重組人 SorCS1 蛋白 Protein

IL2RG Protein Human 重組人 IL2RG / CD132 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IL2RA Protein Mouse 重組小鼠 IL2RA / CD25 蛋白

CDH2 Others Human 人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人細(xì)胞裂解液   CD200R1 Others Mouse 小鼠 CD200R1 人細(xì)胞裂解液   腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105次方(1ml)  滋養(yǎng)層細(xì)胞TM-prf  CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人細(xì)胞裂解液   EAC 小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞 小鼠原代牙周膜成纖維細(xì)胞 兔原代睪丸間質(zhì)細(xì)胞

大鼠精原原代細(xì)胞甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲蛋白酶2(MASP2)重組蛋白 Recombinant Mannose Associated Serine Protease 2 (MASP2)

IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白

PTK6重組小鼠 PTK6 / Brk 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

FCGR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽)

ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。