大鼠髖臼軟骨原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：人原代肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 Li-7(人肝癌細(xì)胞) TM4 正常小鼠Sertoli細(xì)胞 1ml/T75 NCI-H345（懸浮） 小細(xì)胞肺癌 RKO-E6 人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞 小鼠原代肺血管平滑肌細(xì)胞

大鼠髖臼軟骨原代細(xì)胞

大鼠髖臼軟骨細(xì)胞分離自髖關(guān)節(jié)軟骨組織，髖關(guān)節(jié)是人體最大、的關(guān)節(jié)之一，是典型的球臼關(guān)節(jié)。髖關(guān)節(jié)既具有良好的內(nèi)在穩(wěn)定性，也具有靈活的活動(dòng)性。髖臼位于髖骨外側(cè)面中央，呈半球形深凹，直徑約30~50mm，表面覆蓋厚約2mm的透明關(guān)節(jié)軟骨，呈半月形分布。中央是髖臼窩，無(wú)軟骨覆蓋，由哈佛腺充填，可以隨關(guān)節(jié)內(nèi)壓力的增減擠出或者吸入關(guān)節(jié)液，以維持關(guān)節(jié)內(nèi)壓力的平衡。髖臼邊緣的環(huán)形關(guān)節(jié)盂唇可以加深、加寬髖臼，使髖臼容納股骨頭的大部并處于穩(wěn)定的位置，加強(qiáng)了髖關(guān)節(jié)的穩(wěn)定性。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層，單個(gè)分布、體積較小、呈橢圓形，長(zhǎng)軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行，越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形，細(xì)胞核圓形或卵圓形、染色淺，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)，這些關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成，稱為同源細(xì)胞群。電鏡下，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞有突起和皺褶，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

產(chǎn)品名稱：大鼠髖臼軟骨細(xì)胞

組織來(lái)源：軟骨組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次；

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠髖臼軟骨采用膠原酶聯(lián)合蛋白酶消化制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠髖臼軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

兔子血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒

Rat angiopoietin receptor Tie1 (ANG-R-Tie1) ELISA Kit 大鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)試劑盒

Humanhiston-H2bELISAKit 人組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humancytovillin/ezrin,CVL試劑盒人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)試劑盒

組織INSULI激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanplasminogenactivatorinhibitor1，PAI-1ELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒

小鼠K1(VK1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat osteocalcin / bone gla protein (OT/BGP) ELISA Kit 大鼠骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)試劑盒

HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit 人肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶(PPI)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenIerleukin4,IL-4試劑盒雞白介素4(IL-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞IKB-ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mouseglucoprotein130,gp130ELISAKit小鼠糖蛋白130(gp130)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒   96T/48T

小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)試劑盒   96T/48T

小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)試劑盒   96T/48T

小鼠纖連蛋白(FN)試劑盒   96T/48T

G-250快速無(wú)毒型蛋白質(zhì)染色試劑 100ml

Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein 0.5mgTsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein) Tsg101抗原

NCR3重組人 NCR3 / NKp300 蛋白 Protein

IL23 Protein Human 重組人 IL23A & 小鼠 IL12B Heterodimer 蛋白

IL1RAP Protein Human 重組人 IL-1RAcP / IL-1R3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

CES2 Others Mouse 小鼠 CES2 / Carboxylesterase-2 人細(xì)胞裂解液   mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞 小鼠雜交瘤細(xì)胞，7F2細(xì)胞 EL4. IL-2(淋巴瘤細(xì)胞)  BTC Others Mouse 小鼠 BTC / Betacellulin 人細(xì)胞裂解液 小鼠原代牙髓干細(xì)胞 人原代肺動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞

大鼠髖臼軟骨原代細(xì)胞CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4 0.5mlCDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依賴性激酶4(抗原)

AKR1B1 Protein Human 重組人 AKR1B1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SERPINF2重組小鼠 SerpinF2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

SFRP4 Protein Mouse 重組小鼠 sFRP4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HOXA1重組人 HOXA1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。