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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠卵巢上皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠卵巢上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠卵巢上皮原代細胞 | 組織來源 | 卵巢組織 |
英文名稱 | Rat Ovarian Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7211 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠卵巢上皮細胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu)，而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成；髓質(zhì)位于中央，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。卵巢上皮細胞主要功能：①上皮細胞能分泌激素，刺激卵細胞分化成熟；②細胞能分泌炎癥介質(zhì)，參與炎癥反應。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
兔子凋亡誘導因子(AIF)ELISA 試劑盒
Human vasoactive iestinal peptide (VIP) ELISA Kit 人血管活性腸肽(VIP)試劑盒
Humanai-teichoicacidaibody,TAELISAKit 人抗0壁酸抗體(TA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanepidermalkeratin,EK試劑盒人表皮角蛋白(EK)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織PRAK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPancreastatinELISAKit人胰抑制素(Pancreastatin)試劑盒規(guī)格：96T/48T
豚鼠干擾素α(IFNα)試劑盒 ，英文名： IFNα ELISA Kit
Calcium channel aibody (VGCC) ELISA Kit 人鈣離子通道抗體(VGCC)試劑盒
RabbitCoisolELISAKit 兔子(Coisol)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBA(HumanBlockingaibody)ELISAKit人封閉抗體
線蟲基因組DNA分離試劑盒20次
Rabbitbonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit兔骨形成蛋白(BMPs)試劑盒規(guī)格：96T/48T
人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒 人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒、人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
人轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒 人轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 人轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長因子β2 試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
人轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒 人轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 人轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長因子β1 試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
人轉(zhuǎn)化生長因子α試劑盒 人轉(zhuǎn)化生長因子α試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 人轉(zhuǎn)化生長因子α試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)化生長因子α試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長因子α 試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
CPB1重組人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 蛋白 (His 標簽) Protein
內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)重組蛋白 Recombinant Intelectin 1 (ITLN1)
CCL13重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 標簽) Protein
ALCAM Protein Human 重組人 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)
Chang liver細胞，CCL13張氏肝細胞正常 人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細胞株(HEK293),APP-PS1細胞 豚鼠皮膚細胞;GP-S3 人腦血管周細胞裂解物HBVCL 小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記) 小鼠骨骼肌成纖維細胞，NOR-10細胞 小鼠原代胸腺基質(zhì)細胞 小鼠原代睪丸間質(zhì)細胞
大鼠卵巢上皮原代細胞紅細胞生成素受體(EPOR)重組蛋白 Recombinant Erythropoietin Receptor (EPOR)
CDK5 Protein Human 重組人 CDK5 蛋白 (GST 標簽)
FLT3重組小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 Protein
IL17A Protein Canine 重組狗 IL17 / IL17A 蛋白
CRABP1重組人 CRABP1 / RBP5 蛋白 Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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