大鼠腦膜原代細胞

大鼠腦膜細胞分離自腦膜組織；腦膜是顱骨與腦間的隔膜，一共有三層，由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜。腦膜細胞圍繞著大腦，參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育，能穩(wěn)定腦軟膜表面的細胞外基質(zhì)、組織放射狀膠質(zhì)細胞網(wǎng)絡(luò)和小腦皮層分層結(jié)構(gòu)。

產(chǎn)品名稱：大鼠腦膜細胞

組織來源：腦膜組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠腦膜采用消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠腦膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

兔骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒

Human ypsinogen II (y- II) ELISA Kit 人原Ⅱ(y-Ⅱ)試劑盒

Humanai-epidemichemorrhagicfevervirusIgGaibody,EHFIgGELISAKit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgG(EHF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanglathioneS-ansferases,GSTpi試劑盒人硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織單胺氧化酶B型(MAO-B)活性比色法定量試劑盒20次

HumanMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISAKit人Smad7試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA 試劑盒

Human arginine vasopressin (AVP) ELISA Kit 人精加壓素(AVP)試劑盒

PorcineB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit 豬B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAlpha2-AP(HumanAlpha2-Aiplasmin)ELISAKit人α2抗纖溶酶

血液亮(leucine)含量比色法定量試劑盒20次

Mouseβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISAKit小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)試劑盒

豬Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒   豬Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒、豬Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

植物D2試劑盒   植物D2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   植物D2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：植物D2試劑盒、植物D2 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人Dickkopf1試劑盒   人Dickkopf 1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人Dickkopf 1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人Dickkopf 1試劑盒、人Dickkopf 1 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人CD14分子試劑盒   人CD14分子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人CD14分子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人CD14分子試劑盒、人CD14分子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

S100A2重組人 S100A2 蛋白 Protein

血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1(PECAM1)重組蛋白 Recombinant Platelet/Endothelial Cell Adhesion Molecule (PECAM1)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

INHBB Protein Human 重組人 Inhibin beta B / INHBB / Activin B 蛋白

GLYCOPROTEIN Protein Sudan ebolavirus 重組蘇丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白

CL-0317AML-193(人急性單核細胞白血病單核細胞)  大鼠骨髓瘤細胞;IR983F 結(jié)腸腺癌細胞，Caco-2細胞 WEHI 164細胞，鼠纖維肉瘤細胞系  DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 小鼠原代纖維環(huán)細胞 人原代牙周膜成纖維細胞

大鼠腦膜原代細胞鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱγ(CAMK2γ)重組蛋白 Recombinant Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Gamma (CAMK2g)

IRAK4 Protein Human 重組人 IRAK4 / IRAK-4 蛋白

CHEK1重組小鼠 CHK1 / CHEK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CXCL12 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (Fc 標簽)

BCL2L12重組人 BCL2L12 / BCL2-like 12 蛋白 (GST 標簽) Protein