化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠胚胎肝母采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠胚胎肝母經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠胚胎肝母原代細胞 | 組織來源 | 胚胎；肝臟 |
英文名稱 | Rat Embryonic Hepatoblast Cells | 貨號 | YS-01X7652 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠胚胎肝母細胞分離自胚胎肝組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟起源于腹側(cè)前腸內(nèi)胚層細胞（一種多潛能干細胞）。在 ED8.5 的小鼠和 ED9.5 的大鼠，前腸的原始上皮細胞接觸心肌中胚層后快速增殖，形成肝原基。大約1d后，原始上皮細胞侵入原始橫膈，繼續(xù)分化為幼稚肝臟上皮細胞，這些細胞先表達 AFP 然后是ALb。幼稚肝臟上皮細胞很快成熟，并進一步分化為肝細胞或膽管上皮細胞，因為此期的肝臟上皮細胞其具有向這兩種肝實質(zhì)細胞雙向分化的潛能，所以又稱肝母細胞。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
人中期因子(MK)ELISA 試劑盒
People / endotoxin lipopolysaccharide (LPS) ELISA Kit 人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)試劑盒
Humanmelanocyteaibody,MCAbELISAKit 人黑色素細胞抗體(MCAb)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanHydrocoisone,HYD試劑盒人(HYD)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織肌酸激酶(CK)活性酶動力比色法定量試劑盒25次
Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human cytochrome C (Cyt-C) ELISA Kit 人(Cyt-C)試劑盒
Humanai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit 人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancyclooxygenase-2,COX-2試劑盒人環(huán)加氧酶2(COX-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織GSK3β激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPolySeriumAigen,PHSAELISAKit人多聚血清蛋白(PHSA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
人整合素連接激酶1(ILK-1)試劑盒 96T/48T
人整合素αⅤβ3(IegrinαⅤβ3)試劑盒 96T/48T
人真胰島素(TI)試劑盒 96T/48T
人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)試劑盒 96T/48T
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PACAP(1-38 Peptide 0.5mgPACAP(1-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽 1-38(全蛋白)
CD97重組人 CD97 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ITGA5 & ITGB6 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 蛋白
ACVR2B Protein Human 重組人 ACVR2B / ActivinR-IIB 蛋白 (Fc 標簽)
CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞) B95-8細胞，EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細胞 人大腸癌細胞,CL187/CCL187細胞 CM-H125人腦成纖維細胞BPH-1, 人前列腺增生細胞 B淋巴細胞,XJH細胞 PLC/PRF/5(人肝癌細胞) 小鼠原代髓核細胞 小鼠原代臍靜脈內(nèi)皮細胞
大鼠胚胎肝母原代細胞免疫球蛋白G(IgG)天然蛋白 Native Immunoglobulin G (IgG)
CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白
TGFBR3重組小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 蛋白 Protein
TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 標簽)
KDM1A重組人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
化工儀器網(wǎng)