詳細(xì)介紹
大鼠前脂肪原代細(xì)胞
大鼠前脂肪細(xì)胞分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成,聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng),參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量儲(chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細(xì)胞:一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細(xì)胞;另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞呈梭形,有分裂和增殖的能力;成熟的脂肪細(xì)胞呈圓形,已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪細(xì)胞是一類具有增殖和向脂肪細(xì)胞分化能力的特異化前體細(xì)胞,與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細(xì)胞是一種類成纖維細(xì)胞,在演變的過程中不斷吸收脂質(zhì),最終成為成熟的脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞對(duì)外界機(jī)械損傷的抵抗力較強(qiáng),可望成為軟組織缺損的有益填充物。
英文名稱 | Rat Preadipocyte Cells | 組織來源 | 脂肪組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7313 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠前脂肪細(xì)胞
組織來源:脂肪組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前脂肪采用膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前脂肪經(jīng)油紅O染色檢測,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
人乙型肝病毒X抗原(HBxAg)ELISA 試劑盒
Human tissue polypeptide specific aigen (TPS) ELISA Kit 人組織多肽特異性抗原(TPS)試劑盒
HumanangiotensionⅡreceptor1Aibody,ATⅡR1AbELISAKit 人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanIerleukin4,IL-4試劑盒人白介素4(IL-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織亮(leucine)含量比色法定量試劑盒20次
HumanIerleukin23,IL-23ELISAKit人白介素23(IL-23)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠(VD)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat bone morphogenetic protein (BMPs) ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒
HumanProteindisulfide-isomeraseprecursor,PDIELISAKit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenLaminin,LN試劑盒雞層連蛋白/板層素(LN)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseGelsolinELISAKit小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒 96T/48T
兔型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒 96T/48T
兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒 96T/48T
兔內(nèi)皮素(Endothelin-1)試劑盒 96T/48T
EDA2R重組小鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
發(fā)動(dòng)蛋白2(DNM2)重組蛋白 Recombinant Dynamin 2 (DNM2)
GADD45G重組人 GADD45G / CR6 蛋白 Protein
IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白
IL23R Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CM-R034大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1 SMPD1 Others Mouse 小鼠 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 PLAT Others Mouse 小鼠 tPA / PLAT 人細(xì)胞裂解液 小鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞 兔原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞
大鼠前脂肪原代細(xì)胞Beta-Amyloid(1-28 0.5mgBeta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽1-28(多肽蛋白)
ITGAX & ITGB2 Protein Human 重組人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 蛋白
ACVR2A重組小鼠 ACVR2A / ActrIIa 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
FZD4 Protein Rat 重組大鼠 Frizzled-4 / FZD4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽) Protein