大鼠神經干原代細胞

大鼠神經干細胞分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質（灰質）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面，即外側面（約占整個皮質面積的1/3）、內側面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經干細胞具有分化為神經神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞的能力，能自我更新，并足以提供大量腦組織細胞的細胞群。神經干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞，它可以通過不對等的分裂方式產生神經組織的各類細胞。需要強調的是，在腦脊髓等所有神經組織中，不同的神經干細胞類型產生的子代細胞種類不同，分布也不同。神經干細胞作為干細胞的一種，它具有其它所有干細胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力，具有多種分化潛能，具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細胞的能力，這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生，對損傷和疾病具有反應能力。神經干細胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移，并向神經細胞、星形膠質細胞和少突膠質細胞分化的能力，已成為神經系統(tǒng)損傷修復和再生研究的熱點，體外建立穩(wěn)定的神經干細胞培養(yǎng)模型是其基礎和臨床應用的前提。神經干細胞在培養(yǎng)3-4d后，可形成神經球，神經球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長，予以更換半量培基，1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經球和單細胞懸液，將部分細胞接種到新的培養(yǎng)瓶中，2×105個細胞/瓶，每7-10d傳代1次，每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基1次，培養(yǎng)條件不變。

產品名稱：大鼠神經干細胞

組織來源：腦組織

產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細胞形態(tài) 球形

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%，Accutase

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠神經干采用消化后差速貼壁，結合神經干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠神經干經Nestin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。

PLK1重組小鼠 PLK1 / PLK-1 蛋白 Protein

RNA結合基元蛋白20(RBM20)重組蛋白 Recombinant RNA Binding Motif Protein 20 (RBM20)

IZUMO1重組人 IZUMO1 蛋白 Protein

CDK16 Protein Human 重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽)

IL12A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 標簽)

小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒

Humanplacealprotein,PPELISAKit 人胎盤蛋白(PP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumancicaicialPemphigoid,CP試劑盒人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組(leucine)含量比色法定量試劑盒20次

humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISAKit人S100鈣結合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠鐵蛋白試劑盒   小鼠鐵蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠鐵蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠鐵蛋白試劑盒、小鼠鐵蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠糖原0酸化酶同工酶試劑盒   小鼠糖原0酸化酶同工酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠糖原0酸化酶同工酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠糖原0酸化酶同工酶試劑盒、小鼠糖原0酸化酶同工酶試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠糖化   小鼠糖化   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠糖化，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠糖化、小鼠糖化   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠髓過氧化物酶特異性抗粒細胞胞質抗體試劑盒   小鼠髓過氧化物酶特異性抗粒細胞胞質抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠髓過氧化物酶特異性抗粒細胞胞質抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠髓過氧化物酶特異性抗粒細胞胞質抗體試劑盒、小鼠髓過氧化物酶特異性抗粒細胞胞質抗體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

ICAM1重組小鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

CCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted 0.5mgCCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted) 活化T細胞表達和分泌的調節(jié)因子抗原

UBE2F重組人 UBE2F 蛋白 Protein

HEXA Protein Human 重組人 Hexosaminidase A / HEXA 蛋白 (Subunit A, His 標簽)

CSF1R Protein Rat 重組大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (Fc 標簽)

COLO-320細胞，結腸腺癌細胞 直腸腺癌,HR-8348細胞 人巨細胞白血病細胞株;Mo7e  L129細胞，NCTC克隆929細胞 人Butt`s淋巴瘤細胞,Raji細胞 小鼠小膠質細胞;BV2  人間充質干細胞-肝 人肌肉成纖維細胞瘤 小鼠原代腎動脈平滑肌細胞 人原代頜下腺上皮細胞

大鼠神經干原代細胞Hpt/HP(haptoglobin 0.5mgHpt/HP(haptoglobin) 結合珠蛋白/觸珠蛋白抗原

CFHR1 Protein Human 重組人 CFHR1 蛋白

SOST重組大鼠 Sclerostin / SOST 蛋白 Protein

MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白

YES1重組人 c-Yes / YES1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein