大鼠腎動脈平滑肌原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 T84(人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞) CCC-HIE-2 人胚胎腸粘膜組織來源細(xì)胞 1ml/T75 HBL-100 人整合 SV40基因的上皮細(xì)胞 NCI-H446 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人原代牙周膜成纖維細(xì)胞

大鼠腎動脈平滑肌原代細(xì)胞

大鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞分離自腎動脈組織；腎動脈的分支為葉間動脈，穿行于腎柱內(nèi)，上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處，形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細(xì)血管，并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈，進(jìn)入腎小囊后形成球形的毛細(xì)血管網(wǎng)，再匯集成出球小動脈，出腎小體。直小動脈分支形成毛細(xì)血管網(wǎng)，再匯合成直小靜脈，入弓狀靜脈、葉間靜脈，最后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎，注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管，又是腎的機(jī)能血管，與腎泌尿機(jī)能密切相關(guān)。腎動脈在腎實(shí)質(zhì)內(nèi)形成兩個毛細(xì)血管網(wǎng)：腎小球毛細(xì)血管網(wǎng)，血壓較高，利于血漿濾過形成原尿；球后毛細(xì)血管網(wǎng)，血壓較低，利于腎小管的重吸收。腎動脈平滑肌細(xì)胞是腎動脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一，在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。

產(chǎn)品名稱：大鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞

組織來源：腎動脈組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

大鼠棕櫚酰化膜蛋白6(MPP6)試劑盒 ，英文名： MPP6 ELISA Kit

Mouse ai diuretic hormone / vasopressin / arginine vasopressin (ADH/VP/AVP) ELISA Kit 小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒

MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanL-SelectinELISAkit人L選擇素

土壤細(xì)菌DNA分離+高質(zhì)化試劑盒20/50次

ELISAKitAT-Ⅲ大鼠抗Ⅲ抗體

小鼠C肽(C-Peptide)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 大鼠3(VD3)試劑盒

Humahyroid-Peroxidase,TPOELISAKit 人甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancoloncancer-specificaigen-4,CCSA-4試劑盒人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織AURORA-A激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

humanpyridoxal/pyridoxinevitaminB6-phosphatase,PDXPELISAKit人哆/哆醇B60酸酶(PDXP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔色素上皮衍生因子試劑盒   兔色素上皮衍生因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔色素上皮衍生因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔色素上皮衍生因子試劑盒、兔色素上皮衍生因子 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔熱休克蛋白90試劑盒   兔熱休克蛋白90試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔熱休克蛋白90試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔熱休克蛋白90試劑盒、兔熱休克蛋白90 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔熱休克蛋白70試劑盒   兔熱休克蛋白70試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔熱休克蛋白70試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔熱休克蛋白70試劑盒、兔熱休克蛋白70試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔熱休克蛋白40試劑盒   兔熱休克蛋白40試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔熱休克蛋白40試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔熱休克蛋白40試劑盒、兔熱休克蛋白40 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

TNFRSF17重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

chloramphenicol/BSA

PGA4重組人 PGA4 / Pepsinogen A 蛋白 Protein

CTRC Protein Human 重組人 CTRC / chymotrypsin C 蛋白

SIGIRR Protein Mouse 重組小鼠 SIGIRR / TIR8 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

CROT Others Human 人 CROT (474 Leu/Val) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液   NCI-H1650(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)     CL-0097HCT-15(人結(jié)腸癌細(xì)胞)  雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12 小鼠原代三叉神經(jīng)元細(xì)胞 兔原代三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞

大鼠腎動脈平滑肌原代細(xì)胞CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉(zhuǎn)化生長因子β受體抗原 0.5mgCD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉(zhuǎn)化生長因子β受體抗原

HAGH Protein Human 重組人 HAGH / GLO2 / Glyoxalase II 蛋白

SERPIND1重組小鼠 SerpinD1 / HCII 蛋白 Protein

IL7 Protein Rat 重組大鼠 IL7 / interleukin 7 蛋白

SRC重組人 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。