大鼠腎臟巨噬原代細胞

大鼠腎臟巨噬細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調節(jié)水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應。

產(chǎn)品名稱：大鼠腎臟巨噬細胞

組織來源：腎組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 巨噬細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 （12mM）

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠腎臟巨噬采用酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠腎臟巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

大鼠轉化受體電位陽離子通道亞家族M成員6(PM6)試劑盒 ，英文名： PM6 ELISA Kit

Mouse ai double sanded DNA aibody / natural aibody DNA (dsDNA) ELISA Kit 小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒

Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanLebtospiraIgMELISAKit人鉤端IgM

脘蛋白糖基化分型(glycoform)試劑盒5次

ELISAKitAMA大鼠抗單核細胞抗體

小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat acidic fibroblast growth factor 1 (aFGF-1) ELISA Kit 大鼠酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)試劑盒

Humanchaperonin10,CPN10ELISAKit 人伴侶蛋白10(CPN10)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancirculatingimmunecomplex,CIC試劑盒人循環(huán)免疫復合物(CIC)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白H1激酶免疫共沉淀試劑盒10次

Humaudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit人的牛血清白蛋白殘留檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔型纖溶酶原激活物受體試劑盒   兔型纖溶酶原激活物受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔型纖溶酶原激活物受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔型纖溶酶原激活物受體試劑盒、兔型纖溶酶原激活物受體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

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兔淋巴細胞功能相關抗原3試劑盒   兔淋巴細胞功能相關抗原3試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔淋巴細胞功能相關抗原3試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔淋巴細胞功能相關抗原3試劑盒、兔淋巴細胞功能相關抗原3 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

兔粒細胞集落刺激因子試劑盒   兔粒細胞集落刺激因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔粒細胞集落刺激因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔粒細胞集落刺激因子試劑盒、兔粒細胞集落刺激因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

F3重組大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 Protein

ER-alpha 雌激素受體alpha 0.5mgER-alpha 雌激素受體alpha

IGFBP6重組人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 Protein

CSF1R Protein Human 重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (aa 543-922, His & GST 標簽)

CEACAM1 Protein Mouse 重組小鼠 CEACAM1 / CD66a 蛋白

CSF2RA Others Human 人 GM-CSFR 人細胞裂解液   rEPC，大鼠內皮祖細胞-骨髓 正常人細胞，Hs 181.Tes細胞 LLC-MK2(恒河猴腎細胞)  CD40 Others Human 人 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 小鼠原代前脂肪細胞 兔原代軟骨細胞

大鼠腎臟巨噬原代細胞Pepsinogen C peptide 原C蛋白抗原 0.5mgPepsinogen C peptide 原C蛋白抗原

CPLX3 Protein Human 重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白

NA重組甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) Protein

CD34 Protein Human 重組人 CD34 蛋白 (Fc 標簽)

VNN2重組人 VNN2 / Vanin-2 蛋白 Protein