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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的大鼠胎盤絨毛膜采用-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的大鼠胎盤絨毛膜經(jīng)hCG免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠胎盤絨毛膜原代細胞 | 組織來源 | 胎盤 |
英文名稱 | Rat Placental Chorionic Cells | 貨號 | YS-01X8261 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠胎盤絨毛膜細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后，在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起，以細胞滋養(yǎng)層為中軸，外裹合體滋養(yǎng)層，稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸，使初級干絨毛變成了次級干絨毛。當(dāng)絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織，并與胚體內(nèi)的血管相通時，次級干絨毛改稱三級干絨毛。三級干絨毛末端的細胞滋養(yǎng)層細胞形成細胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育，叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤，而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：梭形、多角形
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠胎盤絨毛膜細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
大鼠腫瘤壞死因子α(TNFα)試劑盒 ，英文名： TNFα ELISA Kit
Mouse soluble P selectin (sP-selectin) ELISA Kit 小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒
MouseErythropoietin,EPOELISAKit 小鼠紅細胞生成素(EPO)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanImmunoglobulinA,IgAELISAKitA
微型RNA(miRNA)文庫構(gòu)建技術(shù)試劑盒5次
ELISAKitMT大鼠金屬硫蛋白
小鼠遷移率族蛋白B1(HMGB-1)試劑盒 96T/48T
Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 2 (TIMP-2) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)試劑盒
HumanCenomereProtein,CENP-BELISAKit 人著絲粒蛋白B(CENP-B)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HamsterreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKL試劑盒倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母細胞染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒(包括抗體)20次
MouseBigEndothelin,BigETELISAKit小鼠大內(nèi)皮素(BigET)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠可溶性壞死因子 - 受體 2(mouse sTNF- a R2) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D
小鼠血管細胞粘附分子 -1 (mouse VCAM-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D
小鼠血管內(nèi)皮生長因子 ( mouse VEGF) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 Biosource
小鼠血管內(nèi)皮生長因子 A( mouse VEGF-A) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 奧地利 Bender
EPHB4重組小鼠 EphB4 / HTK 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein
Anti-CSP (circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii 0.5mgAnti-CSP (circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii) 環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原
UBE2L6重組人 UBCH8 / UBE2L6 蛋白 Protein
CSF1 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白
CD99 Protein Rat 重組大鼠 CD99 蛋白 (Fc 標簽)
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 Hep B1.2(人肝癌細胞) 敘利亞倉鼠肌肉細胞;GH-M1 心肌細胞CMM 人癌細胞;MCF7 U251人膠質(zhì)瘤細胞 Human 小鼠原代膀胱上皮細胞 大鼠原代椎體終板軟骨干細胞
大鼠胎盤絨毛膜原代細胞角蛋白4(KRT4)重組蛋白 Recombinant Keratin 4 (KRT4)
CSH1 Protein Human 重組人 Placental Lactogen / CSH1 蛋白
C5重組人 Complement C5a 蛋白 Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
PLA2G2D重組人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 蛋白 (Fc 標簽) Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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