化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠小腸血管內皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠小腸血管內皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 大鼠小腸血管內皮原代細胞 | 組織來源 | 小腸組織 |
英文名稱 | Rat Small Intestine Vascular Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7147 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠小腸血管內皮細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的，因為食物經(jīng)過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養(yǎng)物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切；構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能，其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力，促使食物向下運動。血管內皮細胞除了吞噬異物、細菌、壞死和衰老的組織等，還參與集體免疫活動，包括：①血管收縮及血管舒張，從而控制血壓；②凝血（血栓形成及纖維蛋白溶解）；③動脈硬化；④血管生成；⑤炎癥及腫脹（浮腫）；⑥內皮細胞亦控制一些物質，如白血球進出血管。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
大鼠載脂蛋白C2(APOC2)試劑盒 ，英文名： APOC2 ELISA Kit
Mouse phospho exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 小鼠0酸化細胞外信號調節(jié)激酶(pERK)試劑盒
MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKIT 小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit人絲狀血球凝集素
細胞/組織高粘性多聚賴載玻片制備試劑盒5次(50至100片)
ELISAKitMMP-7大鼠基質金屬蛋白酶7
小鼠熱休克蛋白47(HSP47)試劑盒 96T/48T
Human ornithine decarboxylase (ODC) ELISA Kit 人鳥脫羧酶(ODC)試劑盒
HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISAKit 人肺耐藥蛋白(LRP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
guineapigiestinalfattyacidbindingprotein,iFABP試劑盒豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性濾膜染色試劑盒20次
Mousecalciumchannelblockers,CCBELISAKit小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠堿性0酸酶(ALP)試劑盒 96T/48T
小鼠堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)試劑盒 96T/48T
小鼠堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)試劑盒 96T/48T
小鼠堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)試劑盒 96T/48T
IL25重組大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ERK(Extracellular signal-regulated kinase 0.5mgERK(Extracellular signal-regulated kinase) 原活化蛋白激酶抗原
FGFR4重組人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein
ENPP2 Protein Human 重組人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白
CNTNAP2 Protein Mouse 重組小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白
EFNA1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽) 293ET(人胚細胞（SV40T和EBNA1基因修飾細胞）) 人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2 BB7.2細胞， 分泌A2抗體B淋巴細胞 大鼠肉瘤細胞,WK256細胞 小鼠原代淚道上皮細胞 小鼠原代前列腺成纖維細胞
大鼠小腸血管內皮原代細胞甲狀旁腺激素(PTH)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)
EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白
EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein
IL1B Protein Canine 重組狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白
CPLX3重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
化工儀器網(wǎng)