詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠嗅上皮采用膠原酶-聯(lián)合消化法結合元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠嗅上皮經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠嗅上皮原代細胞 | 組織來源 | 嗅上皮組織 |
英文名稱 | Rat Olfactory Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7579 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介:
大鼠嗅上皮細胞分離自嗅上皮組織;嗅上皮細胞是鼻腔的嗅區(qū)黏膜的一種特殊的感覺性上皮細胞,嗅上皮細胞為棱形雙極細胞,每個細胞表面為細長的嗅毛,突出于嗅區(qū)黏膜上皮細胞表面,而細胞的另一端為中央突,常匯成多數(shù)細微的嗅絲,組成嗅通向顱內(nèi)。這些細胞的特殊結構,是嗅覺功能的重要組成部分。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品:
大鼠乙酰羧化酶α(ACACα)試劑盒 ,英文名: ACACα ELISA Kit
Mouse Annexin V (ANX- V) ELISA Kit 小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒
MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAkit 小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumandermato-poin,DPTELISAKit人皮膚蛋白
細胞Akt2/PKBβ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKiANKL大鼠核因子κB受體活化因子配基
小鼠(CH)試劑盒 96T/48T
Human placeal lactogen (PL) ELISA Kit 人胎盤泌乳素(PL)試劑盒
Humahrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 人抗復合物(TAT)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanazurocidin,AZU試劑盒人天青殺素(AZU)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物源性飼料大豆試劑盒20次
Humahrombin,TMELISAKit人(TM)試劑盒規(guī)格:96T/48T
微量二(MDA)測定試劑盒(TBA法)
總合成酶(NOS)測試盒[測總NOS(T-NOS)]
C(抗壞血酸)(VitaminC)測定試劑盒(比色法)
酯酶(CHE)測定試劑盒(比色法)
CHODL重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 Protein
Gelsolin 凝溶膠蛋白抗原 0.5mgGelsolin 凝溶膠蛋白抗原
FH重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白 (His 標簽) Protein
FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His 標簽)
BLMH Protein Mouse 重組小鼠 BLMH / Bleomycin Hydrolase 蛋白 (His 標簽)
EL4.IL-2細胞,小鼠淋巴瘤細胞 Mo-MuLv/3T3(Mo-MuLv感染的3T3細胞) 人皮膚成纖維樣細胞;HSF2 CD59A Others Mouse 小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 人細胞裂解液 RN-h, 大鼠海馬趾元 正常人細胞 小鼠原代角膜內(nèi)皮細胞 兔原代支氣管平滑肌細胞
大鼠嗅上皮原代細胞ERK(Extracellular signal-regulated kinase 0.5mgERK(Extracellular signal-regulated kinase) 原活化蛋白激酶抗原
ENPP2 Protein Human 重組人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白
IL25重組大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CNTNAP2 Protein Mouse 重組小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白
FGFR4重組人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。