大鼠牙周膜干原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：小鼠原代少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 BEL-7405(人肝癌細(xì)胞) WILS-S 人B淋巴細(xì)胞 1ml/T75 N-H 小鼠骨髓瘤淋巴細(xì)胞 USMC 大鼠血管平滑肌細(xì)胞 人原代關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞

大鼠牙周膜干原代細(xì)胞

大鼠牙周膜干細(xì)胞分離自牙周膜組織；牙周膜（牙周韌帶、牙周間隙）是由致密結(jié)締組織所構(gòu)成。多數(shù)纖維排列成束，纖維的一端埋于牙骨質(zhì)內(nèi)，另一端則埋于牙槽窩骨壁里，使牙齒固位于牙槽窩內(nèi)；牙周膜內(nèi)有、血管、淋巴和上皮細(xì)胞等。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）來源于胚胎時(shí)期的中胚層組織，具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能，具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力，運(yùn)用 MSCs來修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景，目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞。牙周膜干細(xì)胞參與了牙周組織的病變、修復(fù)及再生過程?，F(xiàn)在，利用牙周膜干細(xì)胞建立體外模型，已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。

產(chǎn)品名稱：大鼠牙周膜干細(xì)胞

組織來源：牙周膜

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基：含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠牙周膜干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡(jiǎn)介

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠牙周膜干采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠牙周膜干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)試劑盒 ，英文名： IGFBP3 ELISA Kit

Mouse visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒

MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKIT 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanCyclicAMPresponseelemebindingprotein,CREBELISAKit人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白

細(xì)胞AX1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitALP-B大鼠骨特異性堿性0酸酶B

小鼠鼠痘病毒(MPV)試劑盒 96T/48T

Human gliadin IgA (Gliadin-IgA) ELISA Kit 人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)試劑盒

HumangelsonELISAKit 人凝膠原蛋白(gelson)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Duckviruseeritis,DEV試劑盒鴨病毒性腸病毒(DEV)試劑盒規(guī)格：96T/48T

增強(qiáng)型DAB顯色溶液A液：10毫升B液：90毫升C液：1毫升

MousecyclophilinA,CyPAELISAKit小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

ART4重組小鼠 ART4 / CD297 蛋白 Protein

補(bǔ)體成分4a(C4a)重組蛋白 Recombinant Complement Component 4a (C4a)

COX5B重組人 COX5B 蛋白 Protein

FH Protein Human 重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白

TEK Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Tie2 / TEK 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液   大鼠腦膜細(xì)胞RMC  CL-0073DH82(犬巨噬細(xì)胞)  雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8  F81   貓細(xì)胞  人星形膠質(zhì)細(xì)胞 Human 小鼠原代肌源干細(xì)胞 小鼠原代腹腔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

大鼠牙周膜干原代細(xì)胞ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide 0.5mgATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide) ATP酶通道蛋白抗原

FGFR4 Protein Human 重組人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白

CNTNAP2重組小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白 Protein

IL25 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ENPP2重組人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 Protein