大鼠真皮微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：小鼠原代小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞 HB611(人肝癌細(xì)胞) Reh 人急性非B非T淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞 1ml/T75 F9 小鼠畸胎瘤細(xì)胞 311 果蠅胚胎細(xì)胞 人原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞

大鼠真皮微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自真皮組織；真皮，位于表皮深層，向下與皮下組織相連，真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。微血管內(nèi)皮細(xì)胞（MEC）在炎癥反應(yīng)、腫瘤生長、創(chuàng)面愈合過程中起著非常重要的作用。在創(chuàng)面愈合研究領(lǐng)域，由于表皮細(xì)胞、真皮成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的成熟，人們對這兩種細(xì)胞早已進行了大量深入的研究。與之相比，對參與創(chuàng)面愈合過程的另一種主要細(xì)胞——真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞，則因其體外分離培養(yǎng)技術(shù)的困難而使相關(guān)的研究受限。

產(chǎn)品名稱：大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞

組織來源：皮膚組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠真皮微血管內(nèi)皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠真皮微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

大鼠血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM1)試劑盒 ，英文名： VCAM1 ELISA Kit

Mouse Glucose depende insulinoopic polypeptide (GIP) ELISA Kit 小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒

Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2ELISAkit 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforHumanCampylobacterJejuniPEB1ELISAKit人空腸彎曲菌黏附蛋白

細(xì)胞CSF1R激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitDA大鼠多巴胺

小鼠腦脊髓病毒(TMEV)試劑盒 96T/48T

Skin reactive factor / inflammatory factor (SRF/IF) ELISA Kit 人皮膚反應(yīng)因子/性因子(SRF/IF)試劑盒

Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAA試劑盒人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌NADPH氧化酶活性比色法定量試劑盒20次(10樣本)

MouseAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

POSTN重組小鼠 Periostin / POSTN 蛋白 Protein

Beta-Amyloid (1-42 0.1mgBeta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42)

XCL2重組人 XCL2 蛋白 Protein

FAP Protein Human 重組人 FAP / Seprase 蛋白

CDH5 Protein Rat 重組大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白

FLRT1 Others Human 人 FLRT1 人細(xì)胞裂解液   人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞HRCEpiC  CM-M025小鼠外周血白細(xì)胞原代平滑肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)Many types of cells包裝：500/250/Mv 1 lu   貂肺上皮細(xì)胞 小鼠原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 人原代睪丸支持細(xì)胞

大鼠真皮微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞PT141(Bremelanotide PT-141 1gPT141(Bremelanotide PT-141) 雌性激素肽

FSTL5 Protein Human 重組人 FSTL5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

M1重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein

EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

RELT重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。