詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:鸚鵡熱衣原體探針法熒光定量PCR試劑盒
產品貨號:FS-P013421
產品規(guī)格: 50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
LILRB3/CD85a/PirB/FITC 熒光標記白細胞球蛋白樣受體-B抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Survivin/FITC 綠色熒光標記Survivin蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADRA2 ADRA2腎上腺能受體2抗體 0.1ml
Rabbit Goat IgM/FITC FITC標記的兔抗羊IgM 0.3ml
GRASP 一般受體磷肌醇相關支架蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗狗IgG 0.1ml
Survivin/FITC 綠色熒光標記Survivin蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
GPI(Human glycophosphatidylinositol) ELISA Kit 人糖磷脂酰肌醇Multi-class antibodies: 48T
Matriptase 蛋白裂解(一種新的癌基因)抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh katanin p80 劍蛋白p80抗體 0.2ml
ADP ELISA Kit 大鼠脂聯(lián) 96T
PYGL 肝糖原磷化抗體 0.2ml
CYP2C9 細胞色P450 2C9抗體 0.1ml
Matriptase 蛋白裂解(一種新的癌基因)抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
GABA Transporter 3 γ基丁運載蛋白3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APAF1(NT) 凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端) 0.1ml
IL-17E/IL-25/FITC 熒光標記白介-17E抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/Cy5 Cy5標記的兔抗人IgM 0.1ml
RAR- Alpha /FITC 熒光標記維甲受體-α 抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
鸚鵡熱衣原體探針法熒光定量PCR試劑盒黃直絲鏈霉菌種屬: Streptomyces│flavorectus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株。對產朊圓酵母和稻瘟菌菌絲有溶菌作用。培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 28-32℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
奇異變形桿菌種屬: Proteus│mirabilis提供形式: 其他安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
糖類抗原72-4(CA72-4)ELISA試劑盒山梨 99.8%聚乙烯(PS) 通用型I,一般射出成型用桿菌肽鋅
糖類抗原50(CA50)ELISA試劑盒L-氨甲酯鹽鹽 98%聚乙烯(PS) 通用型II,高強度鹽貝那普利/那普利
糖類抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒L-精氨乙酯 98%聚乙烯(PS) 通用型III,高強度、押出用、食品用鹽貝那普利/那普利(標準品)
糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒L-氨芐酯對甲磺鹽 98%聚乙烯(PS) 耐沖擊型扎貝特
糖類抗原125(CA125)ELISA試劑盒L-天冬氨-β-芐酯 98%聚乙烯(PS) 高光澤度級扎貝特(標準品)
糖基化依賴的黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒Boc-L-谷氨酰 98%聚乙烯(PS) 擠出級布南色林
糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒BOC-L-絲氨 97%聚乙烯(PS) 食品級溴夫定
糖化血紅蛋白(HbA1C)ELISA試劑盒S-芐基-L-半胱氨 98%2,5-二基噁唑 99%, 閃爍級溴夫定(標準品)
糖化低密度脂蛋白(Gly-LDL)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-天冬氨 99%異磺酰酯 98%卡巴他賽
糖化蛋白(GSP)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-纈氨 99%3,4-二甲氧基甲 98%米托蒽醌
糖化白蛋白(GA)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-亮氨 96%3,4-二甲氧基甲 ≥98%, FG拉莫三
糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-氨 98%愈創(chuàng)木酚 CP,98.0%拉莫三 (標準品)
糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-谷氨 98%球型四氧化三鐵磁粉 100-300nmD-半乳糖
糖聚糖(GAG)ELISA試劑盒Fmoc-L-亮氨 98%鄰二甲 ≥99%D-半乳糖(標準品)
羰基化蛋白(PC)ELISA試劑盒Fmoc-L-異亮氨 99%乙酰 AR,98.5%骨化三
羰基還原[NADPH] 1(CBR1/CBR/CRN)ELISA試劑盒Fmoc-L-精氨 98%乙酰 CP,98.0%坎地沙坦酯
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。