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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：寨卡病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013581
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit 人降解加速因子Multi-class antibodies： 48T
Smac/DIABLO 線粒體促凋亡蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat rat IgG whole serum 羊抗大鼠IgG抗血清 1ml
MK(Human Midkine) ELISA Kit 人中期因子 96T
phospho-p95 NBS1 (Ser343) 磷化DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體 0.1ml
Band3 紅細胞陰離子交換蛋白1抗體 0.1ml
Smac/DIABLO 線粒體促凋亡蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
STK(Human serine/threonine protein kinase) ELISA Kit 人絲/蘇蛋白磷Multi-class antibodies： 48T
NCX1/SLC8A1 鈉鈣交換蛋白1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-31RA/CRL3 白介31受體a抗體 0.2ml
MMP-1 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白1 96T
PRMT4 組蛋白精甲基轉(zhuǎn)移CARM1抗體 0.2ml
CPEB1 細胞質(zhì)多聚腺苷結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
NCX1/SLC8A1 鈉鈣交換蛋白1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Donkey Guinea pig IgG/AP 性磷(AP)標記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml
GLUD2 谷脫氫2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASPP1 p53凋亡刺激蛋白1抗體 0.1ml
HRG- Beta/FITC 熒光標記抗HRGβ抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
P-HP1/FITC 熒光標記抗異染色質(zhì)蛋白1磷化抗體(果蠅)IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
寨卡病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒50次Kurtzmanomyces shapotouensis種屬: Kurtzmanomyces│shapotouensis分離基物: 土壤結(jié)皮提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 25C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
恥垢分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium smegmatis提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
木耳種屬: Auriculariaauricula(L.exHook.)Underw.安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食用培養(yǎng)基: 17生長條件: 20-25℃
成纖維生長因子9(FGF9)ELISA試劑盒甲 AR,99.0%鎢 AR氘代(100g )
成纖維生長因子23(FGF-23)ELISA試劑盒鄰二甲 AR,99.5%1,1,1,2-四氟乙 99.95%氘代-D6(0.6ml x 10 )
成纖維生長因子23(FGF23)ELISA試劑盒甲合次硫氫鈉 97.5%碳烯酯 99%氘代-D6(0.5ml x 10 )
層粘連蛋白(Laminin)ELISA試劑盒甲次硫氫鈉 98%碳烯酯 CP氘代-D6(0.55ml x 10)
層連蛋白(Laminin)ELISA試劑盒叔戊基 97%碳烯酯 for HPLC, 99.7%氘代-D6(10g )
表皮生長因子受體2(sp185/Her2)ELISA試劑盒雙(4-溴基) 98%碳烯酯 99.7%,無級氘代-D6(10g )
表皮生長因子受體2(Her2)ELISA試劑盒4-溴基 97%對甲氧基 97.0%氘代-D6(25g)
表皮生長因子受體(EGFR/ErbB1)ELISA試劑盒4-溴代三 97%對甲氧基 AR，99.0% 氘代-D6(50g)
表皮生長因子受體(EGF-R)ELISA試劑盒4-溴-4',4''-二甲基三 95%對甲 98%氘代-D6(100g )
表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒聯(lián)芐 99%對氨基酚 CP，98%氘氧化鈉-d(10g )
半乳糖凝集3(Galectin-3)ELISA試劑盒2-叔丁基蒽醌 98%對氨基酚 99% (HPLC)氘氧化鈉-d(50g )
半乳凝3(GAL-3)ELISA試劑盒4,4'-聯(lián)二甲 97%間 CP,98%氘代三(0.50 mL x 10 )
半乳凝3(GAL3)ELISA試劑盒4,4'-二甲基二 97%間 GR，99%氘代三(10 g )
白介8(IL-8)ELISA試劑盒3,4-二甲基二 98%鄰 GR,99%氘代DMSO-D6(0.5ml x 10)
白介7(IL-7)ELISA試劑盒4,4'-二甲氧基二基 98%鄰 GCS，>99.5% (GC) 氘代DMSO-D6(0.5ml x 10)
白介6受體(IL-6R)ELISA試劑盒4,4'-二甲基三 98%鄰 CP,98%氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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