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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：黃瓜綠斑駁花葉病毒RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013394
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
LRIG1/FITC 熒光標(biāo)記抗LRIG1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SYPH1/FITC 熒光標(biāo)記synphilin-1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Adenylate kinase 2/AK2 腺苷激1抗體 0.2ml
Rabbit Goat IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.1ml
GluR1 谷受體1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgM/Bio 生物標(biāo)記的兔抗雞IgM 0.1ml
SYPH1/FITC 熒光標(biāo)記synphilin-1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
CAM-ab(Human calmodulin specific antibody) ELISA Kit 人抗鈣調(diào)特異抗體Multi-class antibodies： 48T
phospho-IGF1 Receptor (Tyr1161) 磷化胰島樣生長因子1受體抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mammaglobin A 珠蛋白1抗體 0.1ml
BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit 人骨成型蛋白受體1A 96T
RAB40A RAS癌基因家族蛋白RAB40A抗體 0.2ml
phospho-CaMK2 alpha (Tyr231) 磷化鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體 0.1ml
phospho-IGF1 Receptor (Tyr1161) 磷化胰島樣生長因子1受體抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit mouse IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
GLP 2 腸高血糖相關(guān)肽抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Ankyrin erythroid 紅細(xì)胞蛋白Ank1抗體 0.2ml
ILTV/FITC 熒光標(biāo)記抗雞傳染性喉氣管炎病毒抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
RNF126/FITC 熒光標(biāo)記環(huán)指蛋白126抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
黃瓜綠斑駁花葉病毒RT-PCR試劑盒拉森正青霉種屬: Eupenicillium│lassenii分離基物: 針葉樹下的土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: CM0072生長條件: 25℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
萄球菌種屬: Staphylococcus│aureus提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 《消毒技術(shù)規(guī)范》規(guī)定的消械對微生物的殺滅效果檢定評價標(biāo)準(zhǔn)菌種培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
雙氮纖維單胞菌種屬: Cellulomonas biazotea分離基物: Soil from Greenville Agr. Exp. Farm提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: NB生長條件: 30℃，好氧，72h存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
利迪鏈霉菌種屬: Streptomyces│lydicus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain; Produces streptolydigin, lydimycin an培養(yǎng)基: 0329生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
胰抑制(Pancreastatin)ELISA試劑盒葡萄糖 standard for GC, ≥99.5% (GC)間硝 GR,99.0%醋M肽
胰激肽原(PK)ELISA試劑盒葡萄糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品對甲 AR,99.0%鹽甲芬酯
胰高血糖樣肽2受體(GLP2R)ELISA試劑盒胰高血糖氫化物(人) ≥97.0% (HPLC)對甲 99.7%鹽甲芬酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
胰高血糖樣肽2(GLP2)ELISA試劑盒羥基萘酚藍 IND,94%(HPLC)間甲 GR,99%安宮
胰高血糖樣肽1受體(GLP1R)ELISA試劑盒蘇木精 高純級,>99%（HPLC)間甲 CP安宮（標(biāo)準(zhǔn)品）
胰高血糖樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒蘇木精 Biological stain間甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99.7%醋甲地孕酮
胰高血糖(GC)ELISA試劑盒分析標(biāo)準(zhǔn)品，用于顯微鏡,>99.5%（HPLC)，indicator (pH 5.0-6.0)土霉 97%醋甲地孕酮（標(biāo)準(zhǔn)品）
胰多肽(PP)ELISA試劑盒N-乙二-N，N′,N′-三乙 AR,99.0%1,1-二甲硫基硝基乙烯 98%美拉諾坦II；MTII
胰淀(Amylin)ELISA試劑盒二十六 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5% (GC)2-溴-3-甲基吡啶 97%美洛昔康
胰淀粉(PAMY)ELISA試劑盒七氟丁 離子色譜級5-溴-2-氟吡啶 98%美洛昔康（標(biāo)準(zhǔn)品）
胰島抗原2抗體/蛋白酪氨抗體(IA-2A)ELISA試劑盒DL-高半胱氨 95%(R)-(+)-N-叔丁氧羰基-3-氨基吡咯 97%鹽美金剛
胰島抗體(ICA)ELISA試劑盒5-羥甲基糠 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99%(s)-(-)-N-叔丁氧羰基-3-氨基吡咯 98%鹽美金剛（標(biāo)準(zhǔn)品）
胰島自身抗體(IAA)ELISA試劑盒1,2-十六二 95%代二基膦 97%2-巰基乙磺鈉(美司那)
胰島原(PI)ELISA試劑盒正庚 Standard for GC,>99.5%(GC)5--2-氟吡啶 99%2-巰基乙磺鈉(美司那)（標(biāo)準(zhǔn)品）
胰島樣因子3(INSL3)ELISA試劑盒8-羥基喹啉-5-磺 合物 98%二基次膦酰 98%甲氨蝶呤
胰島樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7/MAC25/PSF)ELISA試劑盒二十一 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.5% (GC)二基 99%甲氨蝶呤（標(biāo)準(zhǔn)品）
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