詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:口蹄疫病毒通用RT-PCR試劑盒
產品貨號:FS-P013450
產品規(guī)格: 50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
TPO(Rat Thrombopoietin,TPO )ELISA kit 大鼠血小板生成Multi-class antibodies: 48T
STAT2 信號轉導和轉錄激活因子2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgG/PE PE標記的羊抗人IgG 0.1ml
Alpha1-AGP ELISA Kit 大鼠α1性糖蛋白 96T
NEURL 環(huán)指蛋白67抗體 0.2ml
phospho-Bcl-xL (Thr115) 磷化Bcl-xL蛋白抗體 0.1ml
STAT2 信號轉導和轉錄激活因子2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
PKB(Human protein kinase B) ELISA Kit 人蛋白激BMulti-class antibodies: 48T
Phospho-Nur77 (Ser351) 磷化孤兒核受體蛋白Nur77抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IFNA11/Limitin/Interferon alpha 11 干擾α11抗體 0.2ml
TPA ELISA Kit 大鼠組織多肽抗原 96T
PTK6 酪蛋白激6/激抗體 0.2ml
CREB3L3 環(huán)腺苷應答元件結合蛋白H抗體 0.2ml
Phospho-Nur77 (Ser351) 磷化孤兒核受體蛋白Nur77抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit rat IgM/FITC FITC標記的兔抗大鼠IgM 0.3ml
GDNF 膠質細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APOA1 載脂蛋白A1抗體 0.1ml
IL-10R Beta/IL10RB/CDw210b/FITC 熒光標記白細胞介-10受體β抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human sIgA/PE PE標記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
PSP/FITC 熒光標記抗PSP抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
口蹄疫病毒通用RT-PCR試劑盒假腸膜明串珠菌種屬: Leuconostoc│pseudomesenteroides提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0033生長條件: 26℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法
藤黃紫假交替單胞菌種屬: Pseudoalteromonas│luteoviolacea提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0223生長條件: 26℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
釀酒酵母種屬: SaccharomycescerevisiaeHansen安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 釀造果酒培養(yǎng)基: 51生長條件: 28-30℃
曲霉種屬: Aspergillus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 192生長條件: 24-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
尿微量白蛋白(MAU)ELISA試劑盒鐿粉 99.9%1H-吡唑-3- 98%PD 173074
尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒茜紅 AR,≥80.0%(HPLC)2,2,2-三 98%PH-797804
尿相關蛋白C(UreC)ELISA試劑盒茜黃GG IND二叔戊酰 98%KC-5103
尿嘧啶核苷化1(UPP1)ELISA試劑盒茜黃R AR雙(2,2,6,6,-四甲基-3,5-庚二酮)銅 99%鹽伐昔洛韋/鹽萬乃洛韋
尿激型纖溶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒藍6B IND(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮)釔 99%鹽伐昔洛韋/鹽萬乃洛韋(標準品)
尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒天青I Biological stain烯 AR,>99%(GC),包含180-200 ppm MEHQ 穩(wěn)定劑維庫
尿激型纖溶原激活物(uPA/PLAU)ELISA試劑盒天青I 94%烯, GR,>99.5%(GC)維庫(標準品)
尿激型纖溶原激活物(uPA)ELISA試劑盒天青Ⅱ Biological stain烯丁酯 AR,99%硫長春地辛
尿激型纖溶原激活劑受體(uPAR)ELISA試劑盒天青Ⅱ AR烯丁酯 CP,98%扎西他濱,2',3'-二脫氧胞苷
尿激(UK)ELISA試劑盒鋁試劑 AR乙烯 CP,含10-15ppm 4-叔-丁基鄰二酚穩(wěn)定劑玉米核苷
尿肌酐(UCR)ELISA試劑盒性鉻藍K AR乙烯 99%,含10-15ppm 4-叔-丁基鄰二酚穩(wěn)定劑齊留通
尿苷二葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉移(UGCG)ELISA試劑盒對氨基-N,N-二乙基硫鹽 AR,98%乙乙烯酯 CP,98%齊留通(標準品)
尿苷二葡萄糖轉移2(UGT2)ELISA試劑盒性品紅 Indicator,pH 1.0-3.1二硫化鉬 AR,99%依諾沙星(溶性)
尿苷二葡萄糖轉移1(UGT1)ELISA試劑盒燦爛綠 AR二硫化鎢 99.9%氧氟沙星
尿蛋白(UP)ELISA試劑盒溴甲酚綠 indicator (pH 3.8-5.4) 生物冰袋,500g/袋,190*120*20mm氧氟沙星(標準品)
尿17羥皮質類固(17-OHCS)ELISA試劑盒溴百里香酚藍 ACS, Dye content 95 %特丁硫 分析標準品(劇品)阿巴卡韋