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人結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:28:54瀏覽次數(shù):250

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 結(jié)腸組織
人結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:K1(GLAG-66)人甲狀腺癌
細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLK562人慢性骨髓性白血病系細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLK562人慢性骨髓性白血病系細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLK562/ADR人K562耐阿霉株細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLK562/ADR人K562耐阿霉株細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

結(jié)腸組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自結(jié)腸組織;結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分,大部分固定于腹后壁,結(jié)腸的排列酷似英文字母“M",將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為:黏膜(上皮層、固有層、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結(jié)締組織),肌層(內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑肌),外膜(纖維膜或漿膜)。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。探討正常結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞的分離、體外培養(yǎng)方法,為研究腸黏膜上皮細(xì)胞以及與腸黏膜相關(guān)疾病建立合適的細(xì)胞模型。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用先機(jī)械分離法、后膠原消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

載脂蛋白A1抗體 附睪分泌蛋白4封閉多肽 人髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)ELISA試劑盒

腫瘤抑制基因P53蛋白抗體 鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白8封閉多肽 人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)試劑盒ELISA

缺氧誘導(dǎo)因子1α抑制蛋白/HIF1AN單克隆抗體 胱硫醚γ裂解封閉多肽 人髓鞘蛋白P0(MPZ)ELISA檢測(cè)試劑盒

CLEC2D蛋白抗體 巖藻糖轉(zhuǎn)移8封閉多肽 人髓磷脂P2蛋白(PMP2)ELISA試劑盒

英文名稱: ARP3 BCL7B蛋白封閉多肽 人髓過氧化物特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)試劑盒ELISA

Smad蛋白相互作用蛋白1抗體 精氨酰tRNA合成封閉多肽 人性鐵蛋白(AIF)檢測(cè)試劑盒elisa

核纖層蛋白A抗體 NLRP14蛋白封閉多肽 人性富亮氨核磷蛋白32家族成員E(ANP32E)ELISA試劑盒

外胚層發(fā)育不良蛋白抗體 腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換封閉多肽 人性成纖維細(xì)胞生長因子(aFGF/FGF-1)試劑盒ELISA

英文名稱: phospho-ATF2 (Thr71) 磷化上皮鈣粘附分子封閉多肽 人四氫生物蝶呤(BH4)ELISA檢測(cè)試劑盒

HOXA10抗體 過氧化物體膜蛋白4封閉多肽 人四連接(CLEC3B)ELISA試劑盒

英文名稱: CD38 鞘磷脂沉積病C1樣蛋白1封閉多肽 人死亡相關(guān)蛋白1(DAP/DAP1)試劑盒ELISA

神經(jīng)突觸前膜胞內(nèi)蛋白13抗體 6號(hào)染色體開放閱讀框168封閉多肽 人絲蟲病抗體(IgG4)檢測(cè)試劑盒elisa

腺苷單磷活化蛋白激α1/AMPK α 1抗體 磷化胰島受體底物-1封閉多肽 人絲氨肽抑制劑,Kazal 1型(SPINK1)ELISA試劑盒

白介7抗體 富含脯氨蛋白25封閉多肽 人絲氨肽2甘露聚糖結(jié)合凝集(MASP2)試劑盒ELISA

水通道蛋白4抗體 麻疹病毒血凝封閉多肽 人絲氨HTRA1(HTRA1)ELISA檢測(cè)試劑盒

葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78/熱休克蛋白70蛋白5抗體 神經(jīng)誘導(dǎo)胚胎發(fā)育相關(guān)蛋白Churchill封閉多肽 人絲氨/蘇氨激24(STK24)ELISA試劑盒

英文名稱: phospho-JAK2 (Tyr1007+Tyr1008) 轉(zhuǎn)導(dǎo)β1X連鎖蛋白封閉多肽 人絲氨/蘇氨蛋白激PAK4(PAK4)試劑盒ELISA

FAM55C蛋白抗體 白細(xì)胞介27封閉多肽 人絲氨/蘇氨蛋白激B-raf(BRAF)檢測(cè)試劑盒elisa
人結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞TJ905人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:TJ905細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

TOV-112D人上皮性卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:TOV-112D細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

TOV-112D人上皮性卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:TOV-112D細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

TPC-1人乳頭狀甲狀腺癌株細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:TPC-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

TPC-1人乳頭狀甲狀腺癌株細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:TPC-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

TT人甲狀腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:TT細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

TT人甲狀腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:TT細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

 


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