詳細介紹
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人冠狀動脈平滑肌細胞 |
組織來源 | 冠狀動脈 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
4.細胞簡介:
分離自冠狀動脈組織;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動脈的分布分為三型:右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支。左冠狀動脈為一短干,發(fā)自左主動脈竇,經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構(gòu)成冠狀動脈壁的主要細胞成分,細胞膜上分布著多種離子通道,如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道;它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復極化、超極化,調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖、炎癥及凋亡等。因此,原代分離培養(yǎng)的冠狀動脈平滑肌細胞,對研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
5.方法簡介:
實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測:
實驗室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到如何處理:
1、首先,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
SULT1A1單克隆抗體 DENND1C蛋白封閉多肽
TRIM49蛋白抗體 細胞死亡激活劑CIDE-B封閉多肽
FBX47蛋白抗體 19號染色體開放閱讀框73封閉多肽
鋅指蛋白568抗體 肺炎克雷伯菌新霉磷轉(zhuǎn)移2封閉多肽
白細胞介23P19抗體 磷化c-fos封閉多肽
磷化雄激受體抗體 人乳頭瘤病毒16型L2封閉多肽
交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 妊娠特異性糖蛋白7封閉多肽
血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體 CD7封閉多肽
PRELP蛋白抗體 5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白封閉多肽
白血病相關(guān)新基因抗體 細胞質(zhì)FMR1相關(guān)蛋白封閉多肽
G蛋白偶聯(lián)受體C5L2蛋白抗體 DTD1蛋白封閉多肽
WNK4抗體 白細胞介12 β亞基蛋白封閉多肽
VWCE抗體 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白58封閉多肽
基質(zhì)金屬-17抗體 流感嗜血桿菌蛋白封閉多肽
磷化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體 人類乳頭狀瘤病毒33 E6蛋白封閉多肽
DEPTOR蛋白抗體 FAM171A1蛋白封閉多肽
磷化核糖體S6蛋白激β2抗體 重組25羥化蛋白
嗅覺受體5R1抗體 磷化谷氨受體1封閉多肽
人冠狀動脈平滑肌細胞RIN-m5F (大鼠胰島β細胞瘤細胞)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠腸平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
U-937 (人組織細胞淋巴瘤細胞) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
6T-CEM (人T細胞白血病細胞) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
LS513 (人結(jié)直腸癌細胞) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1%P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
MT-4 (人T細胞白血病細胞) (STR鑒定正確)(僅提供凍存管)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
SW620/LUC (人結(jié)腸癌細胞(熒光標記)) (L15) (STR鑒定正確)Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶