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小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:22:49瀏覽次數(shù):253

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 心臟組織
小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人扁桃體靜脈平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人扁桃體成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人胰腺癌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人胰腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人胰腺成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

心臟組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個(gè)器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等),使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在心臟血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。近年來大量研究表明,心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能和病理改變直接影響心肌細(xì)胞功能,也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位,其作為體外研究的細(xì)胞模型在心肌缺血- 再灌注發(fā)病機(jī)制和細(xì)胞間旁分泌細(xì)胞生長因子研究中起著重要作用。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

組蛋白去乙?;?/span>3單克隆抗體 19號染色體開放閱讀框7封閉多肽 大鼠氫化(HYD)ELISA試劑盒

NDUFAF7蛋白抗體 GTPIMAP家族成員7封閉多肽 大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)試劑盒 ELISA

髓磷酯髓鞘蛋白1抗體 髓鞘蛋白P0樣蛋白1封閉多肽 大鼠C型鈉尿肽(CNP)ELISA檢測試劑盒

絲氨/蘇氨蛋白激KPI2抗體 SGK196蛋白封閉多肽 大鼠αS轉(zhuǎn)移(α-GST) ELISA Kit

酪氨蛋白激3抗體 黑色瘤相關(guān)抗原11封閉多肽 大鼠同型半胱氨(Hcy)ELISA試劑盒

鋅指蛋白664抗體 磷化真核延伸因子激2封閉多肽 大鼠糖皮質(zhì)激受體β(GR-β)試劑盒 ELISA

載脂蛋白D抗體 G蛋白偶合受體激1封閉多肽 大鼠糖皮質(zhì)激受體α(GR-α)ELISA檢測試劑盒

毒蕈堿型乙酰受體M4抗體 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白17/INCA封閉多肽 大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ) ELISA Kit

自噬相關(guān)蛋白9A抗體 環(huán)指蛋白190封閉多肽 大鼠己糖激(HK)ELISA試劑盒

大鼠血清型IgA抗體 25α7羥化封閉多肽 大鼠糖原合成激(GSK)試劑盒 ELISA

磷化蛋白激C α/β2抗體 一氧化氮合成-2(誘導(dǎo)型)封閉多肽 大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA檢測試劑盒

PHD-D4鋅指蛋白2抗體 胰腸同源結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子封閉多肽 大鼠高敏三碘甲狀腺原氨(u-T3)ELISA Kit

甘丙肽信息相關(guān)肽抗體 核糖核結(jié)合蛋白2封閉多肽 大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒

非霍奇金淋巴瘤重復(fù)蛋白3抗體 馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)封閉多肽 大鼠胱天9(Casp-9) 試劑盒 ELISA

LHX5蛋白抗體 組織相容性復(fù)合體α封閉多肽 大鼠阿立新A(Orexin A)ELISA檢測試劑盒

轉(zhuǎn)錄因子HES-1抗體 重組小鼠FCGR1A/CD64蛋白 大鼠胱天3(Casp-3)ELISA Kit

LRWD1蛋白抗體 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3封閉多肽 大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒

整合相關(guān)蛋白CD47 血管緊張Ⅱ受體多肽 大鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)試劑盒 ELISA
小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞兔纖維環(huán)細(xì)胞英文名稱:兔纖維環(huán)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔髓核細(xì)胞英文名稱:兔髓核細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔破骨細(xì)胞英文名稱:兔破骨細(xì)胞5×105提供化學(xué)染色報(bào)告

兔皮膚成纖維細(xì)胞英文名稱:兔皮膚成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔角質(zhì)形成細(xì)胞英文名稱:兔角質(zhì)形成細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔表皮干細(xì)胞英文名稱:兔表皮干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔前脂肪細(xì)胞英文名稱:兔前脂肪細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告


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