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豬脂肪間充質(zhì)干細胞

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):309

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 脂肪組織
豬脂肪間充質(zhì)干細胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠胸腺上皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠胰島細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠角膜基質(zhì)細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠小腸平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠膀胱成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

豬脂肪間充質(zhì)干細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

脂肪組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構(gòu)成,聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時可迅速分解成甘油和脂肪suan,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應,參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織中也存在一些干細胞群,具有自我更新能力和多向分化潛能,被稱為脂肪組織來源的間充質(zhì)干細胞,簡稱脂肪間充質(zhì)干細胞。與骨髓間充質(zhì)干細胞相比,在來源、細胞群特點以及分化潛能等多方面極為相似。但是,脂肪間充質(zhì)干細胞更易獲得足夠數(shù)量的細胞,且獲取過程中對機體損傷更小,是更為理想的自體干細胞源。脂肪組織分離得到脂肪間充質(zhì)干細胞以梭形為主要形態(tài),BrdU可標記其細胞核。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

鋅指蛋白695抗體 GTSF1L蛋白封閉多肽 

磷化核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體 KLF樣轉(zhuǎn)錄因子7封閉多肽 

磷化細胞周期檢測點激2抗體 1號染色體開放閱讀框131封閉多肽 

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 一氧化氮合成-2(誘導型)封閉多肽 

腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白/神經(jīng)球蛋白抗體 轉(zhuǎn)錄因子E2F-5封閉多肽 

環(huán)核苷門控陽離子通道蛋白CNG-1β抗體 泛特異性SENP7封閉多肽 

JAGN1蛋白抗體 GADD45γ相互作用蛋白1封閉多肽 

前列腺癌抑癌蛋白3抗體 4號染色體開放閱讀款 

乳腺癌易感基因復合物HSPC142抗體 24羥化封閉多肽 

-糖共轉(zhuǎn)運載體1抗體 絲氨/蘇氨激作用蛋白11封閉多肽 

驅(qū)動蛋白KIF5A抗體 癌基因c-Raf封閉多肽 

磷化纖維束蛋白同源物1抗體 細胞凋亡水解樣蛋白1封閉多肽 

線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子樣蛋白MTERFD3抗體 HERC3 E3泛蛋白連接封閉多肽 

20號染色體開放閱讀框4抗體 溶質(zhì)載體家族蛋白20成員A1封閉多肽 

腎上腺髓質(zhì)抗體(N端20肽) 脆性X相關(guān)蛋白樣2封閉多肽 

PE標記小鼠抗人CD22單克隆抗體 重組人CTLA4蛋白 

絲氨水解樣蛋白2抗體 CTDSPL蛋白封閉多肽 

磷化HER2受體抗體 重組H5N6-NA蛋白 
豬脂肪間充質(zhì)干細胞AN3 CA (人子宮內(nèi)膜腺癌細胞) (STR鑒定正確)MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

MIA PaCa-2 (人胰腺癌細胞) (STR鑒定正確)DMEM+10%FBS+2.5%HS+1%P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

MDA-MB-231/GFP (人乳腺癌細胞(綠色熒光蛋白標記) (L15) (STR鑒定正確)Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

CNE-2Z (人鼻咽癌細胞) (Hela污染細胞系,)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

MET-5A (人間皮細胞) (STR鑒定正確)M199+10% FBS+ ITS+3.3 nM EGF+400 nM hydrocortisone+1%P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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