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大鼠肌源性干細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:17:27瀏覽次數(shù):314

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 肌肉組織
大鼠肌源性干細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1-A人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLHEC-1-A人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLHEC-1-B人子宮膜腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLHEC-1-B人子宮膜腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLHEK-293(293)人胚腎細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠肌源性干細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肌肉組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自肌肉組織;肌源性干細(xì)胞(MDSCs)屬于成體多能干細(xì)胞,具有多細(xì)胞系分化和自我更新能力。通過誘導(dǎo)刺激,MDSCs可以分化為脂肪、骨骼、軟骨、平滑肌和神經(jīng)細(xì)胞等多種細(xì)胞和組織類型;作為基因治療和組織工程的供體細(xì)胞,已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營養(yǎng)不良等疾病的研究熱點(diǎn);近年來,肌源性干細(xì)胞在治療尿失禁等方面的應(yīng)用逐步得到重視。需注意的是,肌源性干細(xì)胞主要存在于骨骼肌組織中,只是成熟組織的很少部分細(xì)胞;平時(shí)處于靜止?fàn)顟B(tài),在細(xì)胞應(yīng)激和組織缺失時(shí)才會激活;并且隨著年齡的增加,所含細(xì)胞數(shù)量逐漸減少,而目前臨床疾病的治療主要是針對成體進(jìn)行。肌源性干細(xì)胞的體外擴(kuò)增對細(xì)胞移植和干細(xì)胞介導(dǎo)的基因治療至關(guān)重要。對肌源性干細(xì)胞的擴(kuò)增研究發(fā)現(xiàn),EGF、FGF-2和SCF可以通過減數(shù)分裂或促使不分裂細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂周期,從而刺激細(xì)胞增生。更重要的是,細(xì)胞因子誘導(dǎo)的體外擴(kuò)增可以通過自我更新不刺激細(xì)胞分化,從而保持干細(xì)胞表型。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白-胰dan白聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心、差速貼壁法,后通過肌源性干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Sca-1免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化微管相關(guān)蛋白抗體 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白62封閉多肽 豬白介1(IL-1)ELISA試劑盒

NUDCD3蛋白抗體 磷化鈉鉀ATP蛋白a1封閉多肽 豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒ELISA

β葡聚糖受體抗體 腦鈉/利鈉肽封閉多肽  豬Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA檢測試劑盒

肌球蛋白6抗體 絲氨/蘇氨蛋白激Plk2封閉多肽 豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)elisa試劑盒

磷化端粒逆轉(zhuǎn)錄抗體 甲基化樣蛋白4封閉多肽 豬細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒elisa

絲裂原活化蛋白激1抗體 丙型肝炎病毒NS5A反式蛋白13封閉多肽 豬纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)檢測試劑盒elisa

巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體 EB病毒核抗原1封閉多肽 豬纖溶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒

甲基化組蛋白H3(mono methyl K9)單克隆抗體 突觸結(jié)合蛋白相關(guān)基因2封閉多肽 豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒ELISA

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白68抗體 芳香基硫酯K封閉多肽 豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA檢測試劑盒

熱休克蛋白70蛋白12A抗體 3號染色體開放閱讀框17封閉多肽 豬血小板衍生生長因子(PDGF)elisa試劑盒

腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體 鋅指蛋白829封閉多肽 豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒elisa

PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK8蛋白抗體 細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激1封閉多肽 豬組織型纖溶原激活劑(t-PA)檢測試劑盒elisa

血紅氧合 1/熱休克蛋白32抗體 組蛋白賴氨N-甲基SETMAR封閉多肽 豬組織因子(TF)ELISA試劑盒

Bcl-2抗體 指(趾)關(guān)節(jié)粘連NOG蛋白封閉多肽 豬白介1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒ELISA

缺氧誘導(dǎo)因子1α /HIF-1α抗體 重組2 Spike突變蛋白S1(SARS-CoV-2 spike protein;  Spike protein; Spike glycoprotein; Spike protein S1; Surface glycoprotein; Spike protein RBD; SPIKE_SARS2;  Spike S1(L18F,T20N,P26S,D138Y,R190S,K417T,E484K,N501Y,D614G,H655Y), Recombinant (His Tag).  )  豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA檢測試劑盒

黑皮質(zhì)4受體抗體 磷化乙酰羧化封閉多肽 豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)elisa試劑盒

白介1β抗體 唐氏綜合征臨界區(qū)域蛋白4封閉多肽 豬低分子肝(LMWH)試劑盒elisa

胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6抗體 性磷封閉多肽 豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌O((LLO)檢測試劑盒elisa
大鼠肌源性干細(xì)胞OVCAR-3人卵巢腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:OVCAR-3細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

OVCAR-3人卵巢腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:OVCAR-3細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

OVCAR-8人卵巢癌腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:OVCAR-8細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

OVCAR-8人卵巢癌腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:OVCAR-8細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

P53R [JHU-56]人結(jié)直腸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:P53R [JHU-56]細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

P53R [JHU-56]人結(jié)直腸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:P53R [JHU-56]細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

Panc 03.27人胰腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Panc 03.27細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML


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