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大鼠前脂肪細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 15:44:27瀏覽次數(shù):322

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 脂肪組織
大鼠前脂肪細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人星形膠質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人少突膠質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人神經(jīng)干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人小膠質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠前脂肪細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

脂肪組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成,聚集成團的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應(yīng),參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細(xì)胞:一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細(xì)胞;另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞呈梭形,有分裂和增殖的能力;成熟的脂肪細(xì)胞呈圓形,已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪細(xì)胞是一類具有增殖和向脂肪細(xì)胞分化能力的特異化前體細(xì)胞,與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細(xì)胞是一種類成纖維細(xì)胞,在演變的過程中不斷吸收脂質(zhì),終成為成熟的脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞對外界機械損傷的抵抗力較強,可望成為軟組織缺損的有益填充物。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)油紅O染色檢測,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

基因抑制元件1抗體 ETS結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子FEV封閉多肽 豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物(LPO) ELISA試劑盒

英文名稱: EIF2S1 SAPS結(jié)構(gòu)域家族3封閉多肽 豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs) 試劑盒 ELISA

絲氨脫水SDS抗體 同源盒蛋白A2封閉多肽 豚鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra) ELISA檢測試劑盒

胱抑C單克隆抗體 長鏈脂肪轉(zhuǎn)運蛋白1封閉多肽 豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13) ELISA Kit

丙氨乙醛轉(zhuǎn)氨單克隆抗體 脫磷結(jié)構(gòu)域蛋白封閉多肽 豬低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α) ELISA試劑盒

環(huán)指蛋白105抗體 四分子交聯(lián)體5封閉多肽 豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1(GSLT1)試劑盒 ELISA

酪蛋白激casein kinase Iα抗體 肌管相關(guān)蛋白14封閉多肽 豬松弛肽/松弛(RLN)ELISA檢測試劑盒

孕激受體單克隆抗體 賴氨特異性去甲基5B封閉多肽 豬流感病毒A(FLU A)ELISA Kit

可溶性P選擇抗體 膠質(zhì)纖維性蛋白封閉多肽 豬孕激/孕酮(PROG)ELISA試劑盒

補體因子I輕鏈抗體 磷乙醇胺轉(zhuǎn)移2封閉多肽 豬白介-5(IL-5)試劑盒 ELISA

細(xì)胞表面趨化因子受體7單克隆抗體 胰封閉多肽 豬層連蛋白/板層(LN)ELISA檢測試劑盒

溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運蛋白家族30成員2抗體 亮氨氨基肽3封閉多肽 豬Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)  ELISA Kit

腦膜瘤蛋白1抗體 多腺苷二磷多聚封閉多肽/多聚ADP-核糖聚合1封閉多肽 豬可溶性E選擇(sE-selectin) ELISA試劑盒

英文名稱: phospho-C-Myc (Ser62) Ki67蛋白封閉多肽 豬白介13(IL-13) 試劑盒 ELISA

聚合延伸因子2抗體 尿苷磷合成封閉多肽 豬轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2) ELISA檢測試劑盒

9號染色體開放閱讀框174抗體 脫氧核糖核2B封閉多肽 豬E選擇(E-Selectin/CD62E)ELISA Kit

TWIST蛋白2抗體抗體 FRZB蛋白封閉多肽 豬褪黑(MT)ELISA試劑盒

自水解結(jié)構(gòu)域5蛋白抗體 H2A組蛋白家族E蛋白封閉多肽 豬白介12(IL-12/P40)試劑盒 ELISA
大鼠前脂肪細(xì)胞原代間充質(zhì)干細(xì)胞添加劑英文名稱:原代間充質(zhì)干細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代內(nèi)皮祖細(xì)胞添加劑英文名稱:原代內(nèi)皮祖細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代神經(jīng)干細(xì)胞添加劑英文名稱:原代神經(jīng)干細(xì)胞添加劑10mL(50X)

原代周細(xì)胞添加劑英文名稱:原代周細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代雪旺細(xì)胞添加劑英文名稱:原代雪旺細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代黑色細(xì)胞添加劑英文名稱:原代黑色細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代骨骼肌細(xì)胞添加劑英文名稱:原代骨骼肌細(xì)胞添加劑5mL(100X)

 


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