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人肺微血管平滑肌

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更新時間:2023-04-21 12:44:21瀏覽次數(shù):258

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肺組織
人肺微血管平滑肌的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠肝星狀細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106雞氣管黏膜上皮細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106大鼠毛囊干細(xì)胞永生化細(xì)胞原代細(xì)胞永生化1×106人成骨細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人肺微血管平滑肌

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肺組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。肺血管平滑肌細(xì)胞主要功能:①細(xì)胞表面表達介質(zhì)(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng);②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細(xì)胞。肺血管平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞。血管平滑肌細(xì)胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關(guān)鍵因素,新研究表明血管平滑肌細(xì)胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應(yīng),并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān)。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合膠原消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3-5代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

FAPP2蛋白抗體 干擾調(diào)節(jié)因子6封閉多肽 小鼠胃動(MTL)ELISA試劑盒

泛樣蛋白SUMO1激活抗體 單純皰疹病毒糖蛋白D封閉多肽 小鼠生長抑(SS)試劑盒ELISA

鈉離子/?;悄懝厕D(zhuǎn)運蛋白抗體 嗅覺受體5AU1封閉多肽 小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA檢測試劑盒

Bax抗體 重組人結(jié)合蛋白4蛋白 小鼠血小板活化因子(PAF)elisa試劑盒

肌紅蛋白抗體 腦轉(zhuǎn)錄因子4蛋白封閉多肽 小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)試劑盒elisa

抑癌基因SNF2β抗體 整合αL封閉多肽 小鼠肌球蛋白(MYS)檢測試劑盒elisa

β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體 乙基丙二腦病蛋白封閉多肽 小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA試劑盒

干擾調(diào)節(jié)因子9抗體 KIAA1731蛋白封閉多肽 小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)試劑盒ELISA

喹啉磷核糖基轉(zhuǎn)移抗體 谷氨受體亞基δ2/GluR-δ2封閉多肽 小鼠干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA檢測試劑盒

磷化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 短鏈脫氫還原13封閉多肽 小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)elisa試劑盒

磷化成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤抑癌蛋白抗體 細(xì)胞角蛋白15封閉多肽 小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒elisa

吲哚胺2,3-雙加氧抗體 信號通路Wnt5a封閉多肽 小鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)檢測試劑盒elisa

轉(zhuǎn)錄同源蛋白質(zhì)CUX2抗體 細(xì)胞角蛋白39封閉多肽 小鼠生長激釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒

ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運家族蛋白9抗體 跨膜蛋白SEMA5B封閉多肽 小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)試劑盒ELISA

載脂蛋白1抗體 丙二酰脫羧封閉多肽 小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA檢測試劑盒

磷化RhoA蛋白抗體 ELAVL4蛋白封閉多肽 小鼠血栓前體蛋白(TpP)elisa試劑盒

BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 成纖維細(xì)胞生長因子19封閉多肽 小鼠促性腺激釋放激(GnRH)試劑盒elisa

緊密連接蛋白19抗體 抑癌基因NDRG3封閉多肽 小鼠抑制B(INH-B)檢測試劑盒elisa
人肺微血管平滑肌HCT-15/Taxol人結(jié)直腸癌耐藥株細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCT-15/Taxol細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HCT-8人結(jié)直腸癌癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCT-8細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HCT-8人結(jié)直腸癌癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCT-8細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HEC-1-A人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HEC-1-A細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HEC-1-A人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HEC-1-A細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HEC-1-B人子宮膜腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HEC-1-B細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HEC-1-B人子宮膜腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HEC-1-B細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

 


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