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兔椎間盤髓核細(xì)胞

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):303

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 椎間盤組織
兔椎間盤髓核細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:GS-HEPG2人肝癌亞型(過表達(dá)谷氨酰氨合成)細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLGS-HEPG2人肝癌亞型(過表達(dá)谷氨酰氨合成)細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLH9/HTLV-IIIB人T淋巴瘤白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLH9/HTLV-IIIB人T淋巴瘤白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLhacat人永生化表皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

兔椎間盤髓核細(xì)胞分離椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,分為中央部的髓核,富于彈性的膠狀物質(zhì);周圍部的纖維環(huán),由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板,是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。髓核,是乳白色半透明膠狀體,富于彈性,為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分,位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時期的髓核含水量為80%-90%,即使到了老年,其含水量也在70%上下。髓核在出生時體積大而松散,位于椎間盤的中央,至成年時位置移至椎間盤的中后部;在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨,隨著年齡的增長,髓核中的蛋白多糖解聚增多,水分逐漸減少,膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    3-4天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

兔椎間盤髓核細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

椎間盤組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

促卵泡刺激受體抗體 MFSD10蛋白封閉多肽 豚鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒

肝臟X受體β抗體 腦質(zhì)膜單胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT封閉多肽 豚鼠血清總補(bǔ)體(CH50)試劑盒ELISA

突觸后密度蛋白95抗體 絲氨56封閉多肽 豚鼠超氧化物歧化(SOD)ELISA檢測試劑盒

干擾調(diào)節(jié)因子2抗體 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞抗原2封閉多肽 豚鼠組胺(HIS)elisa試劑盒

波形蛋白抗體 高爾基體自身蛋白8J封閉多肽 豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒elisa

磷化活化T細(xì)胞核因子1蛋白抗體 RRP15樣蛋白封閉多肽 豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)檢測試劑盒elisa

人程序性死亡配體1單克隆抗體 氨肽Q封閉多肽 豚鼠生長激(GH)ELISA試劑盒

英文名稱: smooth muscle Myosin heavy chain 11 自噬相關(guān)蛋白9A封閉多肽 豚鼠內(nèi)皮1(ET-1)試劑盒ELISA

磷化磷脂酰肌醇激(PI3Kβ)抗體 脫氫還原7封閉多肽 豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA檢測試劑盒

BCL10單克隆抗體 1號染色體開放閱讀框195封閉多肽 豚鼠免疫球蛋白A(IgA)elisa試劑盒

晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體 紅細(xì)胞膜相關(guān)蛋白ERMAP封閉多肽 豚鼠基質(zhì)金屬抑制因子1(TIMP-1)試劑盒elisa

人絨毛膜促性腺激α 亞基單抗 轉(zhuǎn)錄因子SOX30封閉多肽 豚鼠基質(zhì)金屬9(MMP-9)檢測試劑盒elisa

液泡蛋白分選蛋白13D抗體 MBTD1蛋白封閉多肽 豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒

磷化β 連環(huán)蛋白抗體 磷化周期H封閉多肽 豚鼠γ干擾(IFN-γ)試劑盒ELISA

信號通路Wnt6抗體 甲胎蛋白封閉多肽 豚鼠端粒(TE)ELISA檢測試劑盒

天冬氨-胱氨特異性家族抗體 腺苷環(huán)化1封閉多肽 豚鼠促卵泡(FSH)elisa試劑盒

磷化組蛋白H3抗體 環(huán)指蛋白127封閉多肽 豚鼠腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒elisa

Iroquois同源蛋白1抗體 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白4封閉多肽 豚鼠表皮生長因子(EGF)檢測試劑盒elisa
兔椎間盤髓核細(xì)胞NCI-H292人肺癌(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H292細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

NCI-H292人肺癌(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H292細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

NCI-H295R人腎上腺皮質(zhì)細(xì)腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H295R細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

NCI-H295R人腎上腺皮質(zhì)細(xì)腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H295R細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

NCI-H358人非小肺癌 細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H358細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

NCI-H358人非小肺癌 細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H358細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

NCI-H3122人非小肺癌 細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H3122細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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