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小鼠心臟纖維原細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:43:51瀏覽次數(shù):274

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 心臟組織
小鼠心臟纖維原細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人臍血DC細(xì)胞原代細(xì)胞1×106人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞原代細(xì)胞1×106人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞原代細(xì)胞1×106

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠心臟纖維原細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

心臟組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自心臟組織;心臟由心肌細(xì)胞和非心肌細(xì)胞組成,非心肌細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的70%,其中90%以上的非心肌細(xì)胞由心肌成纖維細(xì)胞組成。纖維細(xì)胞是機(jī)能不活躍的成纖維細(xì)胞。胞體呈梭形,胞質(zhì)較少,弱嗜酸性,胞核小,染色深。電鏡下可見(jiàn),細(xì)胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體均不發(fā)達(dá)。當(dāng)組織受損時(shí),纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為成纖維細(xì)胞而參與修復(fù)過(guò)程。纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞是處于不同功能狀態(tài)的同一種細(xì)胞,如在組織損傷后的修復(fù)過(guò)程中,纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為功能活躍的成纖維細(xì)胞。纖維細(xì)胞較小,呈多角形,胞質(zhì)較少,弱嗜酸性,胞核亦較小,染色較深,電鏡下粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較少,高爾基復(fù)合體不發(fā)達(dá)。成纖維細(xì)胞較大,呈星形或梭形,有突起,細(xì)胞核呈卵圓形,染色質(zhì)稀疏,染色淡,核仁明顯,胞質(zhì)較多。成纖維細(xì)胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖,形成膠原纖維、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維以及基質(zhì)成分。心肌成纖維細(xì)胞主要功能為對(duì)心肌細(xì)胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負(fù)責(zé)細(xì)胞基質(zhì)外的合成,當(dāng)心肌損傷時(shí)能產(chǎn)生旁分泌生長(zhǎng)因子。心肌成纖維細(xì)胞是心臟結(jié)締組織中常見(jiàn)的細(xì)胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機(jī)基質(zhì),并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細(xì)胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細(xì)胞,其功能活動(dòng)也得以恢復(fù),參與組織損傷后的修復(fù)。因此,對(duì)心肌成纖維細(xì)胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個(gè)重點(diǎn)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法制備而來(lái)制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化紅細(xì)胞陰離子交換蛋白1抗體 信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白β2/SIRP-β2封閉多肽 裸鼠蛋白磷(PP)ELISA試劑盒

短鏈脫氫/還原家族9抗體 20號(hào)染色體開放閱讀框194封閉多肽 倉(cāng)鼠基質(zhì)金屬9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B) 試劑盒 ELISA

MED8蛋白抗體 磷化p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激封閉多肽 倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA檢測(cè)試劑盒

IQSEC2抗體 富含脯氨蛋白15封閉多肽 倉(cāng)鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA Kit

有絲分裂激B抗體 促性腺激釋放激受體封閉多肽 倉(cāng)鼠組織K(cath-K)ELISA試劑盒

NEDD4結(jié)合蛋白2樣蛋白1抗體 線粒體核糖體蛋白MRP63封閉多肽 豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG) 試劑盒 ELISA

英文名稱: Human Tau 周期D1封閉多肽 豚鼠白介4(IL-4) ELISA檢測(cè)試劑盒

腺苷單磷活化蛋白激γ2抗體 G蛋白偶聯(lián)受體101封閉多肽 豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA Kit

甲基丙二酰異構(gòu)抗體 磷化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin封閉多肽 豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒

肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Z盤狀蛋白抗體 FAM59B蛋白封閉多肽 豚鼠白三烯D4(LTD4) 試劑盒 ELISA

苯丙氨羥化4抗體 甲硫氨轉(zhuǎn)運(yùn)RNA合成2封閉多肽 豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA檢測(cè)試劑盒

RHOD蛋白抗體 硫轉(zhuǎn)移pi封閉多肽 豚鼠白介12(IL-12/P70) ELISA Kit

鈣調(diào)磷A/鈣依賴磷A抗體 脂肪酰胺水解2封閉多肽 豚鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒

頭狀腎細(xì)胞癌PRCC抗體 胞質(zhì)緊密粘連蛋白1/閉鎖小帶蛋白1封閉多肽 豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)試劑盒 ELISA

蛋白激GCN2蛋白抗體 眼發(fā)育相關(guān)基因蛋白ODAG封閉多肽 豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS) ELISA檢測(cè)試劑盒

β-甘露糖苷抗體 乙酰羧化1/ACCα封閉多肽 豚鼠降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA Kit

白細(xì)胞酪氨激受體抗體 硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2封閉多肽 豚鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒

磷化eIF2B蛋白抗體 鋅指蛋白778封閉多肽 豚鼠血清總補(bǔ)體(CH50) 試劑盒 ELISA
小鼠心臟纖維原細(xì)胞大鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒英文名稱:大鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒200mL

人外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒英文名稱:人外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒200mL

原代上皮細(xì)胞添加劑英文名稱:原代上皮細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代內(nèi)皮細(xì)胞添加劑英文名稱:原代內(nèi)皮細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代成纖維細(xì)胞添加劑英文名稱:原代成纖維細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代平滑肌細(xì)胞低血清添加劑英文名稱:原代平滑肌細(xì)胞低血清添加劑5mL(100X)

原代平滑肌細(xì)胞添加劑英文名稱:原代平滑肌細(xì)胞添加劑5mL(100X)


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