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小鼠肝動脈內皮細胞

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數:305

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產品簡介

供貨周期 現貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肝動脈組織
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詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肝動脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動脈供血,分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈,這3條動脈分別的不同部位。出生后,一般保留一條動脈,大部分為起源于腹腔動脈的動脈,由其分出左、右肝動脈供應左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況,如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈(25%),起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈(10%),而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈,如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時,此種異位起源的肝動脈稱替代動脈,如果在常見肝動脈類型外,還有一支這種異位起始的動脈的一部分血流,這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈內皮細胞是襯于肝動脈內表面的單層扁平上皮,在炎癥時高表達黏附分子,與血流中白細胞表面黏附分子相互作用,從而介導白細胞穿越血管壁,亦屬一類非專職抗原提呈細胞。它們吞噬異物、細菌、壞死和衰老的組織,還參與集體免疫活動,包括:①血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;②凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);③動脈硬化;④血管生成;⑤炎癥及腫脹(浮腫);⑥內皮細胞亦控制一些物質,如白血球進出血管。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合消化法結合差速貼壁法,并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  內皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠肝動脈內皮細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

肝動脈組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

組蛋白H2A抗體 基質金屬9封閉多肽 小鼠促卵泡(FSH)ELISA試劑盒

鈣腔蛋白抗體 帕金森病相關蛋白ATP13A2封閉多肽 小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)試劑盒ELISA

粘蛋白13抗體 幾丁質結構域蛋白1封閉多肽 小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA檢測試劑盒

睪丸特異性Y蛋白樣5抗體 彈性蛋白微原纖維界面因子1封閉多肽 小鼠吡啶交聯物(PY)elisa試劑盒

SLAIN2蛋白抗體 鐵/鋅紫色性磷蛋白封閉多肽 小鼠骨橋(OPN)試劑盒elisa

乙?;M蛋白H2B (Lys20)鼠單克隆抗體 細胞色C氧化亞基3封閉多肽 小鼠促腎上腺皮質激(ACTH)檢測試劑盒elisa

細胞角蛋白7單克隆抗體 三磷焦磷封閉多肽 小鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)ELISA試劑盒

FBXO46蛋白抗體 特異性鉀離子通道蛋白封閉多肽 小鼠轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)試劑盒ELISA

G蛋白偶聯受體31抗體 鋅指蛋白674封閉多肽 小鼠半胱氨抑制劑/胱抑C(Cys-C)ELISA檢測試劑盒

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乙?;M蛋白H2B (Lys23)鼠單克隆抗體 FAM92A1蛋白封閉多肽 小鼠催乳(PRL)檢測試劑盒elisa

英文名稱: MLKL 單核細胞趨化蛋白5封閉多肽 小鼠抵抗(Resistin)ELISA試劑盒

英文名稱: GAPDH-Loading Control 磷化Bcl-2封閉多肽 小鼠乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒ELISA

細胞色氧化裝配因子PET112抗體 軸絲動力蛋白7封閉多肽 小鼠骨鈣/骨谷氨蛋白(OT/BGP)ELISA檢測試劑盒

磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體 IgLON家族蛋白5封閉多肽 小鼠γ氨基丁(GABA)elisa試劑盒

吡啶核苷二硫鍵氧化還原2抗體 腺苷環(huán)化激活肽受體1封閉多肽 小鼠5羥色胺(5-HT)試劑盒elisa

半乳糖凝集3抗體 磷化埃茲蛋白封閉多肽 小鼠P物質受體(SP-R)檢測試劑盒elisa
小鼠肝動脈內皮細胞HBE135-E6E7人支氣管上皮細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HBE135-E6E7細胞專用培養(yǎng)基500ML

HBL-100人整合SV40基因的乳腺上皮細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HBL-100細胞專用培養(yǎng)基125ML

HBL-100人整合SV40基因的乳腺上皮細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HBL-100細胞專用培養(yǎng)基500ML

HCC 38人乳腺導管癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC 38細胞專用培養(yǎng)基125ML

HCC 38人乳腺導管癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC 38細胞專用培養(yǎng)基500ML

HCC1937人乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC1937細胞專用培養(yǎng)基125ML

HCC1937人乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC1937細胞專用培養(yǎng)基500ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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