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大鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 11:05:51瀏覽次數(shù):277

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 視網(wǎng)膜組織
大鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠微血管周細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶NCI-H1299(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶MARC-145 [Marc-145; Marc 145; Marc145] (非洲綠猴胚胎腎細(xì)胞)(種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞5×

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,由色素上皮細(xì)胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細(xì)胞層,專司感光,它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,而視錐細(xì)胞則在中心凹處多。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞,約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力強(qiáng)。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白消化法結(jié)合專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  半貼半懸浮

細(xì)胞形態(tài)  圓形

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

視網(wǎng)膜組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

SET1A蛋白抗體 甲基固醇羥化單加氧1封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 突觸融合蛋白1A/1B封閉多肽 

SH2D7蛋白抗體 甲狀腺受體相互作用蛋白14封閉多肽 

FLJ40288蛋白抗體 細(xì)胞色B5還原4封閉多肽 

絲氨抑制劑B9抗體 磷化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300封閉多肽  

磷化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 雄烷受體CAR封閉多肽 

雙微體2癌基因抗體 繆勒激2型受體封閉多肽 

FBXO10蛋白抗體 基質(zhì)金屬13封閉多肽 

英文名稱: SUZ12 鋅指蛋白567封閉多肽 

KIAA1841蛋白抗體 磷化整合連接激1封閉多肽 

巨噬細(xì)胞炎癥因子1α抗體 跨膜絲氨5封閉多肽 

染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白6抗體 睪丸激受體相關(guān)蛋白/孤兒受體相關(guān)蛋白多肽 

CD9蛋白抗體 周期E2封閉多肽 

微管蛋白折疊輔助因子E樣抗體 重組人C反應(yīng)蛋白 

MARCKS樣蛋白1抗體 piwi樣2蛋白封閉多肽 

促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子/促腎上皮質(zhì)激釋放激抗體 煙堿型乙酰受體ε封閉多肽 

乙型肝炎病毒X抗原激活蛋白5抗體 磷化14-3-3E蛋白封閉多肽 

熱休克蛋白70樣蛋白抗體 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族2封閉多肽 
大鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞PA317 (小鼠成纖維細(xì)胞)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

IBRS-2 [IB-RS-2] (豬腎細(xì)胞)(種屬鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

人小氣道上皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠終板軟骨細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

SK-OV-3/DDP (人卵巢腺癌耐藥性細(xì)胞)McCoy's 5A+DDP+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

CNE (人鼻咽癌細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系,)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠外周血淋巴細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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