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人胰腺上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 14:33:02瀏覽次數(shù):257

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 胰腺組織
人胰腺上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1subclone 14小鼠顱頂前骨亞克隆14細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLMC3T3-E1subclone 14小鼠顱頂前骨亞克隆14細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLMEF小鼠胚胎成纖維細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLMEF小鼠胚胎成纖維細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLMEF(絲裂霉C處理)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

人胰腺上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胰腺組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自分離自?xún)?nèi)胚層胰腺上皮,在隨后的胰腺發(fā)育過(guò)程中,胰腺干細(xì)胞分化為胰島細(xì)胞(α、β、δ、PP細(xì)胞)、導(dǎo)管上皮細(xì)胞以及腺泡細(xì)胞。胰腺組織中還存在大量的間充質(zhì)來(lái)源的細(xì)胞,包括成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞以及星形細(xì)胞,其中以成纖維細(xì)胞占主要部分。要離體分離培養(yǎng)獲得胰腺上皮細(xì)胞就要排除間充質(zhì)來(lái)源的細(xì)胞,尤其是成纖維細(xì)胞。目前常用的去除成纖維細(xì)胞方法有機(jī)械刮除法、胰dan白消化以及膠原消化法等,胰腺上皮細(xì)胞的病變與急慢性胰腺炎的發(fā)生具有重大意義。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原分次消化法并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。

mRNA前體剪接因子PRPF8抗體 重組2 Spike突變蛋白R(shí)BD(BF.7/Omicron) 人載脂蛋白C3(Apo C3)ELISA檢測(cè)試劑盒

腦富含膜附著信號(hào)蛋白1抗體 乙型肝炎病毒X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白9封閉多肽 人(CH)ELISA Kit

絲氨/蘇氨蛋白激Sgk3抗體 TWIST蛋白2封閉多肽封閉多肽 人金屬硫蛋白2(MT2)ELISA試劑盒

晶狀體纖維膜內(nèi)在蛋白抗體 RNA結(jié)合蛋白25封閉多肽 人可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)試劑盒 ELISA

8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框34抗體 電壓門(mén)控鉀通道蛋白1封閉多肽 人3-硝基酪氨(3-NT)ELISA檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng): SAA1 精氨氨基肽B封閉多肽 人糖胺聚糖(GAG)ELISA Kit

胱抑C單克隆抗體 胰島受體底物-2封閉多肽 人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒

?;摎溟L(zhǎng)鏈抗體 信號(hào)通路WNT8A封閉多肽 人鈣腔蛋白(CALU)試劑盒 ELISA

鋅指蛋白710抗體 磷化肌相關(guān)蛋白DAG1封閉多肽 人載脂蛋白A5(apo-A5) ELISA檢測(cè)試劑盒

NLRP14蛋白抗體 整合αM/巨噬細(xì)胞表面分子封閉多肽 人維生D結(jié)合蛋白(DBP)ELISA Kit

Fox2單克隆抗體 細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激4封閉多肽 人硒蛋白1(SEP1)ELISA試劑盒

SLFN13蛋白抗體 磷化Crk p38封閉多肽 人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)試劑盒 ELISA

神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調(diào)節(jié)蛋白1抗體 臂板蛋白4C封閉多肽 人鳥(niǎo)苷結(jié)合蛋白4(Gbp4)ELISA檢測(cè)試劑盒

人白介6單克隆抗體 核苷腺苷轉(zhuǎn)移2封閉多肽 人細(xì)胞色b561(cytb561)ELISA Kit

G蛋白α抑制蛋白2抗體 神經(jīng)叢蛋白A2封閉多肽 人脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2(LCN2)ELISA試劑盒

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽5輕鏈抗體 ATP依賴(lài)解旋SMARCA2封閉多肽 人脂肪細(xì)胞型脂肪結(jié)合蛋白(aFABP)試劑盒 ELISA

新的飽食分子蛋白抗體 胞生長(zhǎng)因子蛋白 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA檢測(cè)試劑盒

CX3CL1抗體 絲氨/蘇氨蛋白激SRPK1封閉多肽 人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA Kit
人胰腺上皮細(xì)胞人少突膠質(zhì)細(xì)胞英文名稱(chēng):人少突膠質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人神經(jīng)干細(xì)胞英文名稱(chēng):人神經(jīng)干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞英文名稱(chēng):人腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人小膠質(zhì)細(xì)胞英文名稱(chēng):人小膠質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人雪旺細(xì)胞英文名稱(chēng):人雪旺細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞英文名稱(chēng):人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人腦微血管平滑肌細(xì)胞英文名稱(chēng):人腦微血管平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告


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