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小鼠肌腱干細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 12:42:50瀏覽次數(shù):303

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肌腱組織
小鼠肌腱干細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:鴨腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106湖羊瘤胃上皮細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106豬肝星狀細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106豬鼻腔粘膜上皮細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106小鼠腎小球系膜細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自肌腱組織;肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結(jié)締組織,便于肌肉附著和固定。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上,是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動不同骨的運動。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分,肌腹由肌纖維構(gòu)成,色紅質(zhì)軟,有收縮能力,肌腱由致密結(jié)締組織構(gòu)成,色乳白較硬,沒有收縮能力。肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長肌的肌腱多呈圓索狀,闊肌的肌腱闊而薄,呈膜狀,又叫腱膜。此處的肌腹即為通常所說的紅肌,而肌腱即為白肌,分別控制肌肉的力量、爆發(fā)力和耐力。肌腱干細(xì)胞(TSCs)是一種來源于肌腱組織的間充質(zhì)干細(xì)胞,其具有多向分化潛能,并且在外源性前列腺素E2作用下異常分化。體外培養(yǎng)時該細(xì)胞群具有克隆形成能力、自我更新及多向分化潛能等干細(xì)胞的普遍特性。肌腱干細(xì)胞可以被誘導(dǎo)向脂肪細(xì)胞、軟骨樣細(xì)胞、骨細(xì)胞分化;在裸鼠模型中,肌腱干細(xì)胞還可以形成肌腱樣組織,軟骨樣組織以及腱-骨連接樣組織等。相比骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞而言,TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力,軟骨相關(guān)基因和肌腱相關(guān)基因表達(dá)更高,具有更好的成骨、成脂和成軟骨能力,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原、中性dan白混合消化法并通過肌腱干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠肌腱干細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肌腱組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

α2C-AR腎上腺能受體抗體 生物標(biāo)記重組人CD86/B7-2蛋白 小鼠Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒

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FITC標(biāo)記小鼠抗人CD86單克隆抗體 擬南芥ACA11封閉多肽 小鼠受體(TR)elisa試劑盒

CD3E抗體 鋅指蛋白X染色體蛋白封閉多肽 小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)試劑盒elisa

IMPACT蛋白抗體 叉頭蛋白J1封閉多肽 小鼠磷肌醇3激(PI3K)檢測試劑盒elisa

磷化核突觸蛋白α抗體 脊髓性肌癥蛋白SMA/封閉多肽 小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒

磷化酪氨激C-SRC抗體 糖基轉(zhuǎn)移6結(jié)構(gòu)1封閉多肽 小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)試劑盒ELISA

磷化熱休克蛋白90β抗體 磷化細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-1封閉多肽 小鼠蛋白激B(PKB)ELISA檢測試劑盒

BCL2相關(guān)X蛋白抗體 富含亮氨重復(fù)神經(jīng)元5封閉多肽 小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)elisa試劑盒

CD5抗體 轉(zhuǎn)錄因子Tbx5封閉多肽 小鼠血紅氧合2(HO-2)試劑盒elisa

粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體 重組小鼠IgG3 Fc蛋白 小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)檢測試劑盒elisa
小鼠肌腱干細(xì)胞H9/HTLV-IIIB人T淋巴瘤白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:H9/HTLV-IIIB細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

H9/HTLV-IIIB人T淋巴瘤白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:H9/HTLV-IIIB細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

hacat人永生化表皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:hacat細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

hacat人永生化表皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:hacat細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HACAT+LUC人永生化表皮熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HACAT+LUC細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HACAT+LUC人永生化表皮熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HACAT+LUC細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HBE135-E6E7人支氣管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HBE135-E6E7細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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