實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；

4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品名稱(chēng)：斑馬魚(yú)胚胎成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品英文：pac2細(xì)胞

貨號(hào)：BJ-01X1757

細(xì)胞培養(yǎng)條件：L15+10%FBS+1%P/S   28℃培養(yǎng)

生長(zhǎng)狀態(tài)：貼壁生長(zhǎng)

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細(xì)胞STR鑒定：不提供STR鑒定報(bào)告

保存培養(yǎng)溫度（℃）28℃

運(yùn)輸溫度（℃）：常溫

我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，*進(jìn)口來(lái)源，*保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿(mǎn)37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

黏著斑激(FAK)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 尿嘧啶仲丁苯 99%豐度：99atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

鳥(niǎo)氨氨酰轉(zhuǎn)移(OCT)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒尿嘧啶苯丁 99%豐度：10atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

鳥(niǎo)氨脫羧(ODC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒尿苷4-溴苯苯 97%豐度：99atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

鳥(niǎo)苷交換因子(GEF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  尿苷4-溴-4',4''-二三苯 95%豐度：10atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

鳥(niǎo)苷結(jié)合蛋白4(GBP4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 尿苷2-叔丁蒽醌 98%豐度：99atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

孕激素誘導(dǎo)阻斷因子(PIBF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒尿苷N,N'-雙(3-氨)乙二 97%豐度：10atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

尿苷二磷葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖轉(zhuǎn)移(UGCG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷一磷己二二異辛酯 99%豐度：99atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

尿激型纖溶原激活因子(PLAU/uPA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷一磷苯磺 98%豐度：10atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

尿嘧啶核苷磷化1(UPP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷一磷二鈉鹽N'N-雙(3-氨) 98%豐度：99atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

尿素相關(guān)蛋白C(UreC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 5-尿苷一磷二鈉鹽溴鄰苯三酚紅 Indicator豐度：10atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

內(nèi)皮素受體B(ETRB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷一磷二鈉鹽(S)-(-)-2- 99%豐度：99atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

凝溶膠蛋白(GS)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 5-尿苷一磷二鈉鹽乙叔丁 97%豐度：10atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

凝血(TM)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷二磷3,4-苯并芘 96%豐度：99atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

凝血/抗凝血復(fù)合物(TAT)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷二磷2- 98%豐度：10atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

凝血敏感蛋白1(TSP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷二磷仲丁 97%豐度：99atom％；化學(xué)純度：≥98.5％

凝血受體(TR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷二磷二鈉鹽2-(2-溴乙)-1,3-二惡烷 98%豐度：10atom％；化學(xué)純度：≥98.5％
pac2細(xì)胞大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽辣椒,辣椒素（天然提取標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

人白三烯D4辣蓼（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

小鼠抗核抗體萊苞迪甙A（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

兔抑瘤素M萊苞迪甙C（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

小鼠鑰孔蟲(chóng)戚血藍(lán)蛋白萊苞迪甙D（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

大鼠解整合素樣金屬蛋白9萊苞迪苷GHuman, Mouse

人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白萊菔子（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

植物血凝素蘭雪醌,白花丹醌,白花丹素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

小鼠解整合素樣金屬蛋白9藍(lán)布正（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat