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HCC38細(xì)胞專用培養(yǎng)基

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):446

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 125mL×4
主要用途 僅供科研實驗 產(chǎn)品濃度
HCC38細(xì)胞專用培養(yǎng)基的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠卵巢顆粒細(xì)胞 小鼠尿道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基XWLC-05+GFP 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 小鼠膀胱成纖維細(xì)胞 人Naive T cell 細(xì)胞 小鼠膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基ECV-304 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞 CTX-TNA2大鼠腦I型星形

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

產(chǎn)品形態(tài)

HCC38細(xì)胞專用培養(yǎng)基

125mL×4

液體

商品詳細(xì)介紹:

由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HCC38細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HCC38細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HCC38細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

產(chǎn)品說明

產(chǎn)品形態(tài):液體

產(chǎn)品濃度:1×

產(chǎn)品規(guī)格:125mL×4

培養(yǎng)基成分:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S

細(xì)菌檢測:陰性

真菌檢測:陰性

支原體檢測:陰性

細(xì)胞生長實驗:細(xì)胞生長良好,形態(tài)正常

內(nèi)毒素含量(EU/mL):≤3

儲存條件:2~8℃,避光儲存

運輸條件:冰袋冷藏運輸

有效期:3個月

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實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
公司產(chǎn)品僅用于科研

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