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兔肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 10:40:55瀏覽次數(shù):181

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 肺靜脈組織
兔肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:A172人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106A-204人橫紋肌肉瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106A2058人黑色瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106A2780人卵巢癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106A2780+GFP人卵巢癌細(xì)胞+GFP人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自肺大靜脈組織;肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中,把動脈血由肺送回心臟的靜脈,是一個(gè)靜脈里流動脈血的血管。左右1對,共4條,兩條連接右肺,兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接,而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓,是由于肺靜脈內(nèi)血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下,肺循環(huán)具有血壓低、阻力小和順應(yīng)性大的特點(diǎn),肺動脈壓力高低取決于單位時(shí)間內(nèi)肺動脈血流量和肺血管的阻力,要維持肺循環(huán)的低壓、低阻的狀態(tài),必須保證整個(gè)肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻,血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細(xì)血管進(jìn)入肺靜脈,再入左心室,經(jīng)過左心室收縮進(jìn)入體循環(huán),才能避免肺動脈內(nèi)壓力升高。細(xì)胞呈多邊形鵝卵石狀排列;該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-3代

消化液  0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

兔肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肺靜脈組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化真核翻譯起始因子4E抗體 RNA結(jié)合蛋白15封閉多肽 人α/β干擾受體(IFN-α/βR)ELISA試劑盒

TWIST蛋白抗體 乙?;M蛋白H3封閉多肽 人B細(xì)胞生長因子(BCGF)試劑盒ELISA

磷化熱休克蛋白27抗體 重組寨卡病毒包膜蛋白 人B細(xì)胞分化因子(BCDF)ELISA檢測試劑盒

性磷酶樣蛋白2抗體 腎病樣蛋白3封閉多肽 人上皮細(xì)胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)elisa試劑盒

前列腺F2a受體抗體PGF2αR 胰島樣生長因子2mRNA結(jié)合蛋白3封閉多肽 人可溶性粘附分子(Sam)試劑盒elisa

補(bǔ)體應(yīng)答基因32抗體 促腎上腺皮質(zhì)釋放激受體2封閉多肽 人巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)檢測試劑盒elisa

英文名稱: Cytokeratin 4 成纖維細(xì)胞生長因子受體4封閉多肽 人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒

CD68抗體 膽囊收縮8封閉多肽 人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成(TSLP)試劑盒ELISA

熱休克蛋白90β/HSP90 β 抗體 脊髓灰質(zhì)炎受體相關(guān)蛋白1封閉多肽 人穿孔/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA檢測試劑盒

可溶性蘋果脫氫酶抗體 麻疹病毒融合蛋白封閉多肽 人多效生長因子(PTN)elisa試劑盒

半胱氨酰白三烯受體1型抗體 1號染色體開放閱讀框85封閉多肽 人可溶性CD28(sCD28)試劑盒elisa

英文名稱: HDAC2 KDELC2蛋白封閉多肽 人淋巴細(xì)胞因子檢測試劑盒elisa

英文名稱: Rad51 精子相關(guān)抗原7封閉多肽 人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒

胎盤催乳1/2抗體 鋅指蛋白518封閉多肽 人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)試劑盒ELISA

毒蕈堿型乙酰受體單克隆抗體 含patatin樣磷脂酶1封閉多肽 人神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)ELISA檢測試劑盒

溶酶體磷脂酶3抗體 FITC標(biāo)記鏈霉親和 人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)elisa試劑盒

人血管內(nèi)皮生長因子單克隆抗體 JWA蛋白封閉多肽 人可溶性細(xì)胞因子受體(sCKR)試劑盒elisa

軸突生長因子CD108抗體 TRIM44蛋白封閉多肽 人可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)檢測試劑盒elisa
兔肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞A2780+GFP人卵巢癌細(xì)胞+GFP英文名稱:A2780+GFP1×1061640+10%FBS+1%L- +1%P/S  提供A2780細(xì)胞STR鑒定報(bào)告

A3人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱:A31×1061640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

A375人惡性黑色瘤細(xì)胞英文名稱:A3751×106DMEM+10%FBS+1%鈉+1%L-+1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

A375+EGFP人惡性黑色瘤細(xì)胞+EGFP英文名稱:A375+EGFP1×106DMEM+10%FBS+1%鈉+1%L-+1%P/S提供A375細(xì)胞鑒定報(bào)告

A431(A-431)人表皮癌細(xì)胞英文名稱:A431(A-431)1×106 DMEM+10%FBS+1%L-+1%鈉+1%P/S  提供STR鑒定報(bào)告

A498人腎癌細(xì)胞英文名稱:A4981×106 MEM+10%FBS+1%P/S  提供STR鑒定報(bào)告

A549 人肺癌細(xì)胞 英文名稱:A5491×106 F12K+10%FBS+1%P/S   提供STR鑒定報(bào)告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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