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人肺癌成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 16:42:27瀏覽次數(shù):186

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肺癌組織
人肺癌成纖維細胞的相關產(chǎn)品:兔肺微血管內(nèi)皮細胞原代細胞5×105兔肺動脈內(nèi)皮細胞原代細胞5×105兔肺動脈平滑肌細胞原代細胞5×105兔肺動脈外膜成纖維細胞原代細胞5×105兔II型肺泡上皮細胞原代細胞5×105

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人肺癌成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

肺癌組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肺癌組織;肺癌是常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤,絕大多數(shù)肺癌起源于支氣管粘膜上皮,故亦稱支氣管肺癌。肺癌可向四周乃至全身擴散。肺癌發(fā)病率和死亡率增長快,對人群健康和生命威脅大的惡性腫瘤之一。近50年來許多國家都報道肺癌的發(fā)病,女性發(fā)病率占第二位,死亡率占第二位。肺癌的病因至今尚不明確,大量資料表明,長期大量吸煙與肺癌的發(fā)生有非常密切的關系。肺癌,其實不是一種病,而是幾十種病的組合,有多種亞型,多種特性;根據(jù)肺癌細胞在顯微鏡下的形態(tài)特點,可以初步分為兩種類型:小細胞肺癌(SCLC)15%和非小細胞肺癌(NSCLC)85%。這兩種類型肺癌的生長特點、擴散風險和治療方案均不相同。絕大多數(shù)肺癌是非小細胞肺癌,約占85%。它又能進一步被分為三類,分別是:腺癌,鱗癌和大細胞癌。其中腺癌是主要的類型,約占非小細胞肺癌中的50%。如果是不吸煙的女性患者,幾乎全部都是腺癌。是肺癌組織中的癌相關成纖維細胞,癌相關成纖維細胞(cancer associated fibroblast,CAF)在腫瘤微環(huán)境中的重要作用已受到廣泛的重視。該細胞通過與癌細胞的直接接觸、分泌多種因子以及對腫瘤基質的改造,促進腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉移甚至耐藥性的發(fā)生。隨著研究的深入,有人提出CAF可能成為抗治療的新靶點。然而CAF的分化來源多樣,相應的形態(tài)和功能各異,因此深入了解CAF的分化來源有利于更全面地認識腫瘤發(fā)展的機制,為臨床治療提供理論依據(jù),體外培養(yǎng)肺癌成纖維細胞對肺癌研究有重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

回腸絨毛刷狀緣膜蛋白抗體 細胞色P450 4Z2P封閉多肽 

磷化腫瘤易感候選基因3抗體 半乳糖腦苷脂封閉多肽 

滑膜肉瘤X斷點蛋白8抗體 磷化表皮生長因子受體封閉多肽 

雄激受體相關蛋白24抗體 血清反應因子輔助蛋白SAP2封閉多肽 

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 胞漿動力蛋白輕鏈1封閉多肽 

谷氨脫羧-65單克隆抗體 磷化絲裂原活化蛋白激3K9封閉多肽 

卷曲蛋白6抗體 G蛋白γ2封閉多肽 

防御β-118/β-defensin 118抗體 B淋巴細胞新型蛋白1封閉多肽 

活性氧物種調(diào)節(jié)因子1抗體 λ輕鏈封閉多肽 

NUDT18蛋白抗體 SH3YL1蛋白封閉多肽 

核孔蛋白50抗體 非活性雙特異性磷封閉多肽27封閉多肽 

糖蛋白激β亞基5抗體 CD2結合蛋白1封閉多肽 

轉錄因子相關蛋白NK1抗體 絲氨/蘇氨蛋白激LMTK3封閉多肽 

磷化心臟磷蛋白抗體 γ-微管蛋白復合物GCP3封閉多肽 

羧酯4A抗體 科凱恩氏綜合癥相關蛋白/早衰蛋白CSA封閉多肽 

英文名稱: SARS-CoV-2 () Nucleocapsid 磷化突觸后密度蛋白95封閉多肽 

突觸細胞粘附分子3抗體 肌動蛋白相關蛋白2/3亞型2封閉多肽 

英文名稱: COX4I1 整合結合性信號分子封閉多肽 
人肺癌成纖維細胞小鼠腸道干細胞培養(yǎng)基100mL小鼠腸道干細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠腸道干細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠腸道干細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠腸道干細胞的體外培養(yǎng)。

DMEM低糖(含HEPES,不含鈉)500mL-

T/G HA-VSMC細胞專用培養(yǎng)基125mL×4T/G HA-VSMC細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持T/G HA-VSMC細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含T/G HA-VSMC細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于T/G HA-VSMC細胞的體外培養(yǎng)。

兔脊髓神經(jīng)元細胞培養(yǎng)基100mL兔脊髓神經(jīng)元細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔脊髓神經(jīng)元細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔脊髓神經(jīng)元細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔脊髓神經(jīng)元細胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

大鼠視乳頭星形膠質細胞培養(yǎng)基100mL大鼠視乳頭星形膠質細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠視乳頭星形膠質細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠視乳頭星形膠質細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠視乳頭星形膠質細胞的體外培養(yǎng)。

大鼠前列腺成纖維細胞培養(yǎng)基100mL大鼠前列腺成纖維細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠前列腺成纖維細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠前列腺成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠前列腺成纖維細胞的體外培養(yǎng)。

NCI-H209 [H209]細胞專用培養(yǎng)基125mL×4NCI-H209 [H209]細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持NCI-H209 [H209]細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含NCI-H209 [H209]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NCI-H209 [H209]細胞的體外培養(yǎng)。

 


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