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大鼠腎成纖維細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 16:45:10瀏覽次數(shù):177

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腎組織
大鼠腎成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔食管平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔食管成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔胃黏膜上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔胃平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔胃成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

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產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠腎成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腎組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基suan、鈉離子、鉀離子、碳suan氫鈉等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)suan堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損以及骨創(chuàng)傷的修復(fù)有著十分重要的作用。腎成纖維細(xì)胞是腎臟結(jié)締組織中重要的細(xì)胞類型,在體外培養(yǎng)中,一般大致成梭形、多角形或不規(guī)則形等,為貼壁生長型細(xì)胞。剛分離的腎成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。其主要功能有:①組成過濾屏障內(nèi)壁的重要部分;②在炎癥和致血栓物質(zhì)的刺激合成必要的生物活性分子;③受損后影響系膜細(xì)胞和上皮細(xì)胞,進(jìn)而影響腎臟病變。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

英文名稱: BrdU(Proliferation Marker) 胞外分泌型絲氨/蘇氨蛋白激FAM20C封閉多肽 

EXOC1蛋白抗體 淋巴細(xì)胞衍生C-型凝集封閉多肽 

/睪丸抗原11.4抗體 G蛋白偶聯(lián)受體78封閉多肽 

蛋白酪氨磷1C抗體 減數(shù)分裂誘導(dǎo)蛋白IME1封閉多肽 

FRMPD2抗體 脂肪分化相關(guān)蛋白封閉多肽 

突觸相關(guān)蛋白25重組鼠單克隆抗體 錯配修復(fù)蛋白1封閉多肽 

CRB3蛋白抗體 MIF4GD蛋白封閉多肽 

G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 酪氨激A封閉多肽 

破傷風(fēng)毒輕鏈抗體 防御β-113/β-defensin 113封閉多肽 

連接蛋白JPH4抗體 GalNAc-TL5蛋白封閉多肽 

肌肉果糖二磷抗體 三葉肽因子3封閉多肽 

核帽結(jié)合蛋白2樣蛋白抗體 鈣穩(wěn)態(tài)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白封閉多肽 

溶質(zhì)載體家族25成員1抗體 雌激受體α/β封閉多肽 

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體 富含半胱氨CRIP2蛋白封閉多肽 

RNA結(jié)合蛋白MAK16抗體 磷化整合連接激1封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體34抗體 CSMD1封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian ChAT乙酰轉(zhuǎn)移封閉多肽 

Cy5標(biāo)記小鼠抗人CD3單克隆抗體 煙堿型乙酰受體α5封閉多肽 
大鼠腎成纖維細(xì)胞人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

BRL細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4BRL細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持BRL細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含BRL細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于BRL細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

兔乳腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL兔乳腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔乳腺成纖維細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔乳腺成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔乳腺成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人乳腺癌血管周細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人乳腺癌血管周細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人乳腺癌血管周細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人乳腺癌血管周細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人乳腺癌血管周細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MEM (含雙抗)500mL-

兔肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL兔肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

Calu-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4Calu-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持Calu-1細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含Calu-1細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于Calu-1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。


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