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人骨髓造血干細胞

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):565

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨髓組織
人骨髓造血干細胞的相關產(chǎn)品:兔腎小球內(nèi)皮細胞原代細胞5×105兔腎足細胞原代細胞5×105兔輸尿管上皮細胞原代細胞5×105兔輸尿管平滑肌細胞原代細胞5×105兔膀胱上皮細胞原代細胞5×105

詳細介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人骨髓造血干細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

骨髓組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。造血干細胞具有自我更新能力并能分化為各種血細胞的前提細胞,終生成各種血細胞成分,包括紅細胞,白細胞和血小板。造血干細胞需要根據(jù)機體的生理需求適時的補充血液系統(tǒng)各個成熟細胞組分。同時在損傷、炎癥等應激狀態(tài)下,造血干細胞也扮演著調(diào)節(jié)和維持體內(nèi)血液系統(tǒng)各個細胞組分的生理平衡的角色。臨床治療中,造血干細胞移植廣泛應用于血液系統(tǒng)疾病以及自身免疫疾病,在其它實體瘤的治療中,比如淋巴瘤,生殖細胞瘤,乳腺癌,小細胞肺癌,主要應用于常規(guī)治療失敗或復發(fā)難治以及具有不良預后因素的患者。造血干細胞以不對稱有絲分裂方式進行增殖,一個干細胞分裂產(chǎn)生兩個子細胞,一個分化為造血祖細胞,另一個則保持干細胞特征。造血干細胞在不斷體外培養(yǎng)產(chǎn)生大量造血祖細胞同時,保持自己既不增殖也不分化。體外培養(yǎng)微環(huán)境合適,造血干細胞可持續(xù)維持培養(yǎng) 60 天左右。 造血干細胞體外增殖培養(yǎng)需要基質(zhì)細胞滋養(yǎng)(滋養(yǎng)層細胞),缺少滋養(yǎng)層細胞不增殖,無法長期培養(yǎng),本產(chǎn)品為收集培養(yǎng)好的造血干懸浮細胞灌裝發(fā)貨,不包含滋養(yǎng)層,因此收貨后建議盡快實驗。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養(yǎng)基篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、SCF、IL-3、TPO、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  懸浮

細胞形態(tài)  圓形

傳代特性  不建議傳代

消化液  

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

脫氫激亞型2抗體 皮膚T細胞淋巴瘤相關抗原5封閉多肽 

促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子/促腎上皮質(zhì)激釋放激抗體 SYF2蛋白封閉多肽 

D型多巴色脫羧抗體 突觸相關蛋白23封閉多肽 

CD10單克隆抗體 9號染色體開放閱讀框66封閉多肽 

二?;视王;D(zhuǎn)移2樣蛋白6抗體 組胺雞卵白蛋白偶聯(lián)物 

促甲狀腺受體抗體(C端) 乙?;D(zhuǎn)移10封閉多肽 

核自身抗原SP140抗體 原癌基因AF4蛋白封閉多肽 

SAPS結構域家族3抗體 酪氨羥化封閉多肽 

鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體 RNA結合蛋白35A封閉多肽 

ADP核糖基化因子GTP激活蛋白1抗體 過氧化物體生成蛋白5相關蛋白封閉多肽 

Cy3標記小鼠抗人CD8單克隆抗體 延胡索酰乙酰乙水解封閉多肽 

還原型輔Ⅱ氧化5/腺嘌呤二核苷磷抗體 軸突蛋白5封閉多肽 

舞蹈癥相關蛋白40/8相關蛋白/第八因子相關蛋白抗體 重組小鼠FcRn蛋白 

早老蛋白-1抗體 卵泡刺激結合蛋白1封閉多肽 

eIF4H蛋白抗體 解旋樣轉(zhuǎn)錄因子封閉多肽 

乳腺癌易感基因1抗體 富含亮氨重復蛋白48封閉多肽 

退行性精母細胞同源物1抗體 MAGOH蛋白封閉多肽 

DEK癌基因結合蛋白 基質(zhì)金屬-26封閉多肽 
人骨髓造血干細胞GMEM (Glasgows MEM)500mL-

Ham's F-12500mL-

Ham's F-12K(不含L-)500mL-

小鼠子宮成纖維細胞培養(yǎng)基100mL小鼠子宮成纖維細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠子宮成纖維細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠子宮成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠子宮成纖維細胞的體外培養(yǎng)。

SW579 [SW 579; SW-579]細胞專用培養(yǎng)基(DMEM)125mL×4SW579 [SW 579; SW-579]細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SW579 [SW 579; SW-579]細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SW579 [SW 579; SW-579]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SW579 [SW 579; SW-579]細胞的體外培養(yǎng)。

大鼠睪丸支持細胞培養(yǎng)基100mL大鼠睪丸支持細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠睪丸支持細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠睪丸支持細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠睪丸支持細胞的體外培養(yǎng)。

22RV1細胞專用培養(yǎng)基125mL×422RV1細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持22RV1細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含22RV1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于22RV1細胞的體外培養(yǎng)。


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