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大鼠附睪上皮細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 16:53:01瀏覽次數(shù):332

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 附睪
大鼠附睪上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔前列腺基底細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔腎集合管上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔輸尿管成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔腎周肌成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠附睪上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

附睪

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自附睪組織;附睪(Epididymis)是一個由曲折、細(xì)小的管子構(gòu)成的器官,一端接著輸精管(Ductusdeferens),一端接著睪丸(Testis)的曲細(xì)精管,具體結(jié)構(gòu)主要包括輸出小管和附睪管。附睪緊貼睪丸的上端和后緣,可分為頭、體、尾三部。精子離開睪丸后通過輸出小管進入附睪。附睪具有暫存精液并分泌附睪液營養(yǎng)精子的功能,以促進精子的進一步成熟附睪的功能是暫存精子,促進精子的進一步成熟。精子在附睪內(nèi)獲得運動能力,總共停留8~17天,終達到功能上的成熟。在這個過程中,精子除了自身的因素,還受到附睪微環(huán)境的影響,這包括了一系列的物理、化學(xué)變化和精子形態(tài)的改變。可以說,附睪微環(huán)境正常穩(wěn)定是附睪發(fā)揮促成熟這一功能的必要條件。若附睪的功能發(fā)生異常,精子則不能成熟,引起不育。附睪上皮含有主細(xì)胞、基細(xì)胞、亮細(xì)胞等幾種類型細(xì)胞。基細(xì)胞,其頂部離附睪管腔有一定距離,在附睪各部分,其形態(tài)沒有差別,一般認(rèn)為是貯備細(xì)胞;另一種主細(xì)胞,是維持附睪生理功能的物質(zhì)基礎(chǔ),在各區(qū)段的主細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)差別很大,這也反映出各區(qū)段的生理功能的差異。除上皮細(xì)胞外,附睪的管壁組織結(jié)構(gòu)也有規(guī)律性的變化,附睪管起始段平滑肌有自發(fā)地節(jié)律性收縮,而尾部平滑肌就沒有這種特點,僅在射精一瞬間出現(xiàn)強烈的節(jié)律收縮。作為負(fù)責(zé)提供適合精子成熟微環(huán)境的附睪,具有活躍的分泌與吸收功能。其中,附睪上皮的電解質(zhì)和水分的轉(zhuǎn)運,對保持附睪內(nèi)合適的離子濃度和suan堿度,為精子成熟提供適宜的環(huán)境起著相當(dāng)重要的作用。睪丸的支持細(xì)胞每天能產(chǎn)生大量睪網(wǎng)液,如一只公羊每天約能分泌40毫升睪網(wǎng)液,而從附睪排出的只不過幾百微升,也就是說睪丸分泌液有99%被附睪上皮重新吸收回體內(nèi)。動物實驗表明,結(jié)扎輸精管時睪丸不會腫脹,但若結(jié)扎睪丸輸出小管,睪丸第二天就會腫脹,這就充分證實了附睪存在著強有力的吸收功能,但是重新吸收的意義尚不清楚。體外培養(yǎng)附睪上皮細(xì)胞對精子的發(fā)育、成熟,附睪生理基礎(chǔ)功能研究具有重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

STAC1蛋白抗體 脂肪水解LIPN封閉多肽 

PSD95結(jié)合蛋白1抗體 重組人胎盤生長因子蛋白 

英文名稱: GFP 人類皰疹病毒8封閉多肽 

磷化磷脂酰肌醇激/PI3 Kinase P85α/γ抗體 血型糖蛋白A/涎糖蛋白封閉多肽 

磷化視網(wǎng)膜色變性蛋白4抗體 滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β7封閉多肽 

磷化結(jié)蛋白抗體 基因抑制元件1封閉多肽 

富含絲氨精子發(fā)生相關(guān)蛋白2抗體 有絲分裂激B封閉多肽 

HRC蛋白抗體 跨膜蛋白74封閉多肽 

γS-crystallin蛋白抗體 重組核衣殼突變蛋白(D3L,P13T,D103Y,D128Y,H145Y,R203K,G204R,T205I,S235F), His tag, (南非) 

干擾腎細(xì)胞癌蛋白2抗體 CD97封閉多肽 

磷脂轉(zhuǎn)移蛋白抗體 肌球蛋白結(jié)合蛋白H樣蛋白封閉多肽 

去整合樣金屬28抗體 黑色瘤相關(guān)抗原C1封閉多肽 

3-羥基異丁脫氫抗體 GTP激活蛋白ASAP3封閉多肽 

鉻細(xì)胞瘤患者抑癌基因SDHB抗體 磷化S6核糖體蛋白封閉多肽 

非受體型蛋白酪氨磷7抗體 重組人腎小球細(xì)胞粘附分子受體蛋白 

廣泛控制氨基合成1樣蛋白1抗體 叉頭蛋白O3A封閉多肽 

絲氨/精氨相關(guān)蛋白53抗體 癲癇相關(guān)基因6封閉多肽 

信號肽復(fù)合物亞基2抗體 堿性螺旋環(huán)螺旋蛋白MESP2封閉多肽 
大鼠附睪上皮細(xì)胞大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

HBE135-E6E7 細(xì)胞專用培養(yǎng)基100mLHBE135-E6E7細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HBE135-E6E7細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HBE135-E6E7細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HBE135-E6E7細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

Ham's F-12培養(yǎng)基,干粉5×1L-

RPMI-1640 (含L-丙氨酰-L-、HEPES,不含酚紅)500mL-

人表皮黑色細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人表皮黑色細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人表皮黑色細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人表皮黑色細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人表皮黑色細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MC/CAR細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4MC/CAR細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MC/CAR細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MC/CAR細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MC/CAR細(xì)胞的體外培養(yǎng)。


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