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上海吉至生化科技有限公司

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培養(yǎng)基凍干的步驟

2023-12-14 閱讀(259)

1.所有凍干培養(yǎng)基、保護(hù)劑以及容器等均需高溫高壓滅菌。高壓滅菌前,在試管內(nèi)貼上印有培養(yǎng)物標(biāo)識(shí)的紙標(biāo)簽。或者,使用帶無(wú)菌帽的試管

2.取一環(huán)分離后所得到的細(xì)菌菌液或者是甘油保存的菌液,在細(xì)菌培養(yǎng)板上分區(qū)或者使用蛇形劃板,37℃倒置培養(yǎng)并過(guò)夜
3.取一只干凈并且進(jìn)行高溫高壓滅菌后的試管,倒入大約10ml的細(xì)菌培養(yǎng)液(大腸桿菌用磅培養(yǎng)液),從過(guò)夜培養(yǎng)后的培養(yǎng)平板中取一個(gè)單菌落至該培養(yǎng)液中后,在37℃溫度條件下振蕩培養(yǎng)過(guò)夜。
4.10支清洗干凈且進(jìn)行滅菌處理后的西林瓶,每個(gè)西林瓶中加入 1ml的凍干保護(hù)劑,后加入過(guò)夜培養(yǎng)后的1ml 菌液,蓋上無(wú)菌橡膠塞,備注:需要保留出氣孔,并做好標(biāo)記后,存放于-80℃冰箱冷凍存儲(chǔ)
5.細(xì)菌凍干機(jī)預(yù)熱約30分鐘后,迅速將已冷凍的菌液放在細(xì)菌凍干機(jī)上,打印幾小時(shí)至十幾小時(shí)不等細(xì)菌已凍干。
6.凍干后關(guān)閉凍干機(jī),取出已經(jīng)凍干好的細(xì)菌,壓蓋密封,存儲(chǔ)在 -80℃條件下超低溫冰箱保存,可存放數(shù)年。




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