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利用高分辨一級質(zhì)量信息進(jìn)行定量和定性，只考察了10ng/mL作為LLOQ的定量穩(wěn)定性，很好的達(dá)到了臨床實(shí)驗(yàn)室的要求。用Vanquish結(jié)合Q Exactive高分辨質(zhì)譜檢測血清中類胰島素生長因子的方案提供了杰出的生物兼容性，不僅獲得了良好的色譜峰型，也使得殘留降到低。

 

圖1 類胰島素生長因子定量，定性和內(nèi)標(biāo)離子的色譜質(zhì)譜圖

圖2 在線固相萃取液相系統(tǒng)儀器配制

 

類胰島素生長因子（insulin-like growth factor 1, IGF1）在臨床上是一個(gè)非常重要的肽段類激素，通常用于評估由于生長激素的紊亂所導(dǎo)致的青少年生長發(fā)育的異常。目前國內(nèi)類胰島素生長因子1的檢測方法主要為免疫法，但采用免疫法檢測類胰島素生長因子1已經(jīng)被長期的臨床實(shí)踐證明存在許多的不足。然而，基于質(zhì)譜的臨床檢測方法已經(jīng)被越來越多的醫(yī)院檢驗(yàn)科和臨床實(shí)驗(yàn)室所追捧，因?yàn)橘|(zhì)譜法有出色的靈敏度，特異性和穩(wěn)定性。該方案我們就利用了Orbitrap超高分辨質(zhì)譜結(jié)合實(shí)驗(yàn)室常見的超高壓液相系統(tǒng)來進(jìn)行類胰島素生長因子1的檢測。

 

結(jié)論

該方案建立了一種基于Vanquish超液相色譜和QE Focus超高分辨質(zhì)譜在血清中檢測類胰島素生長因子的方法。該方法采用兩步蛋白沉淀和在線固相萃取的方法來實(shí)現(xiàn)樣品的凈化，終獲得了滿足高通量臨床實(shí)驗(yàn)室日常檢測的結(jié)果。