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技術文章

蛋白藥物定量分析-液相色譜質譜聯(lián)用儀

閱讀:865          發(fā)布時間:2019-7-10

蛋白質藥物的定量分析貫穿于藥物的研發(fā)與生產全過程。傳統(tǒng)制藥的PK/PD理論,對于生物技術藥物來說同樣適用,但需要綜合生物藥物自身特點而變化。劑量-濃度-效應關系和暴露-反應關系都離不開準確的定量分析。并且,蛋白質藥物的生產工藝優(yōu)化,降解產物和雜質分析,質量控制等工藝過程,同樣需要準確定量。因此,無論對于藥物研究工作者,還是生物制藥企業(yè)來說,建立簡便快速,準確的生物技術藥物定量方法是非常重要的。

 

島津公司液相色譜三重四極桿質譜聯(lián)用儀系列(LCMS-8030/8040/8050),為蛋白質藥物定量分析提供了的強大工具。


LCMS-8030三重四極桿液質聯(lián)用儀采用島津公司技術,實現(xiàn)了水平的超快速性能和數(shù)據(jù)重現(xiàn)性。其中,作為心臟部位的[CID碰撞室]采用了島津公司專門開發(fā)的UF Sweeper®碰撞室,消除記憶效應,即使在快速測定時也可獲得高可靠性的定性/定量數(shù)據(jù),保證痕量組份的準確定量分析結果。500通道/秒的超高速MRM測定;15,000u/sec的超快速掃描速度;15msec的超快速正負離子切換速度等的超快速質譜性能,是與UHPLC超快速分離的組合。

 

LCMS-8040是性能*的三重四極桿液質聯(lián)用儀,秉承了UFMS(Ultra Fast Mass Spectrometer)系列產品的超快速特點,適用于同時定量/定性分析。LCMS-8040可以提供的掃描速度、超快速正負極性切換和555通道/秒的MRM測定能力,同時獲得同類型儀器中高水準的靈敏度。創(chuàng)新升級的離子透鏡和碰撞池設計,增強離子聚焦,減少離子損失,更是將各種掃描模式的靈敏度全面提升。尤其是在MRM模式下,靈敏度提高5倍,充分拓展了應用領域,能分析出更多復雜基質中的痕量化合物。除此之外,UFsweeper®II碰撞室,還將可能產生的串擾降至低。

 

LCMS-8050是性能*的超快速三重四極桿液.質聯(lián)用儀,采用高透射率離子光學系統(tǒng),待輔助加熱氣的ESI接口以及基于UFsweeper III的高CID效率,實現(xiàn)了水平的高靈敏度?;赨F switching技術的超快速正負極性切換時間僅為5ms,保持高品質與高靈敏度的同時,無損定量準確度。在任何掃描速度下,都可保持譜圖品質的超快速掃描技術UF Scanning,30,000u/sec高速掃描讓定量與定性同時實現(xiàn)。產品設計兼顧耐久性和操作簡便性,維護簡單,縮短停機時間。

 

島津UFMS 結合Skyline 軟件加速蛋白定量分析方法開發(fā)
島津UFMS 的特點就是能夠執(zhí)行超快速的MRM 分析,從而減少了分析次數(shù)。圖1 給出的例子是僅通過一針進樣完成BSA 酶解產物MRM 方法開發(fā)的過程。8 分鐘內完成總數(shù)為1710 個MRM 通道分析,盡管目標肽段與其他高豐度肽段共同流出,但是UF-MRM 分析過程中依然成功地完成了多對MRM 通道9 個不同碰撞能量的優(yōu)化。圖2 比較了一次進樣采用UF-MRM 技術對1710 個MRM 通道進行CE 能量優(yōu)化獲得的數(shù)據(jù)和多次進樣采用傳統(tǒng)的延遲時間和駐留時間獲得的數(shù)據(jù)。結果表明,使用UF-MRM 技術,僅使用一次進樣(駐留時間3 ms,延遲時間1 ms)就能夠獲得理想的優(yōu)化數(shù)據(jù),在高速數(shù)據(jù)采集的過程中信號強度沒有任何損失。結合Skyline 的直觀性和島津LCMS-8050 的UF-MRM 的特點,定量蛋白質組學分析的通量得到了極大的提高。

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