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采用超高效液相色譜快速分析化妝品用原料月桂 酰甘氨酸
閱讀：401 發(fā)布時(shí)間：2025-1-14摘要本文采用配備 Agilent 1290 Infinity II ELSD 的 Agilent 1260 Infinity II 超高效液相色譜系統(tǒng)，建立了一種針對(duì)化妝品用原料月桂酰甘氨酸的質(zhì)量控制分析方法，并比較了在不同校準(zhǔn)方式下所得到的實(shí)際樣品檢測(cè)結(jié)果之間的差異。結(jié)果表明，基于月桂酰甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行定量，所開(kāi)發(fā)的方法在線(xiàn)性、靈敏度和精密度等方面均滿(mǎn)足方法學(xué)要求；且三種實(shí)際樣品的色譜圖比較結(jié)果顯示，月桂酰甘氨酸未受到干擾，表明該方法具有良好的專(zhuān)屬性。
前言在化妝品中，具有面部清潔作用的潔面乳是一大類(lèi)產(chǎn)品。潔面乳中起清潔作用的一般是表面活性劑，其包括陰離子表面活性劑、陽(yáng)離子表面活性劑、非離子型表面活性劑和兩性離子表面活性劑。在這些表面活性劑中，作為陰離子表面活性劑的氨基酸類(lèi)表面活性劑以其溫和、低毒、生物相容性好、發(fā)泡力強(qiáng)、環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)而得到廣泛應(yīng)用。氨基酸類(lèi)表面活性劑通常由氨基酸和脂肪酸合成，且常用氨基酸包括肌氨酸、甘氨酸、谷氨酸和絲氨酸等。目前最常見(jiàn)的一類(lèi)氨基酸類(lèi)表面活性劑是甘氨酸型表面活性劑，包括椰油酰甘氨酸和月桂酰甘氨酸等。對(duì)于此類(lèi)表面活性劑的質(zhì)量控制，目前見(jiàn)諸報(bào)道的方法主要有：采用 LC-UV 在 203 nm 下測(cè)定月桂酰谷氨酸含量的方法[1]；采用α-溴代苯乙酮化衍生化方法進(jìn)行樣品前處理，然后利用 LC-UV 在254 nm 下分析不同椰油基氨基酸類(lèi)表面活性劑中不同鏈長(zhǎng)的脂肪酸組成[2]。但對(duì)于應(yīng)用日益廣泛的月桂酰甘氨酸，暫未查到相關(guān)檢測(cè)方法。因此，有必要建立相應(yīng)的質(zhì)量控制方法來(lái)保證月桂酰甘氨酸從原料到成品的質(zhì)量，從而確?；瘖y品使用的安全性和有效性。其中面臨的挑戰(zhàn)在于，從化學(xué)結(jié)構(gòu)來(lái)看，月桂酰甘氨酸與文獻(xiàn)報(bào)道的月桂酰谷氨酸一樣，缺乏強(qiáng)紫外吸收基團(tuán)。如果基于末端吸收，使用如文獻(xiàn)[1] 所報(bào)道的方法進(jìn)行分析時(shí)，可能存在色譜基線(xiàn)波動(dòng)、測(cè)定穩(wěn)定性差等問(wèn)題。對(duì)于此類(lèi)低紫外吸收或者無(wú)紫外吸收的物質(zhì)，利用具有通用性響應(yīng)的蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD) 進(jìn)行檢測(cè)，一般能夠獲得較好的靈敏度和基線(xiàn)，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
本文采用配備 Agilent 1290 Infinity II ELSD 的 Agilent 1260 InfinityII 超高效液相色譜系統(tǒng)，建立了一種針對(duì)月桂酰甘氨酸的質(zhì)量控制分析方法，取得了比較理想的結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)部分試劑和樣品乙腈為色譜級(jí)，購(gòu)自安譜公司；甲酸為色譜級(jí)，購(gòu)自 Sigma 公司；實(shí)驗(yàn)用水為 Millipore Milli-Q 超純水系統(tǒng)現(xiàn)制備的高純?nèi)ルx子水；月桂酰甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)品以及月桂酰谷氨酸鉀樣品 1、樣品 2 和樣品 3 由用戶(hù)提供。
儀器和設(shè)備采用 Agilent 1260 Infinity II 液相色譜系統(tǒng)，配備如下安捷倫組件：Agilent 1260 Infinity II 四元泵（部件號(hào) G7104C）、Agilent1260 Infinity II 自動(dòng)進(jìn)樣器（部件號(hào) G7129C）、Agilent 1260Infinity II 柱溫箱（部件號(hào) G7116A）和 Agilent 1290 Infinity IIELSD（部件號(hào) G7102A）。標(biāo)準(zhǔn)溶液制備標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：稱(chēng)取適量月桂酰甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)品，加入乙腈:水 = 60:40的混合溶液，超聲處理 10 min，使其溶解，制得每 1 mL 含 1 mg的溶液，搖勻后待用。標(biāo)準(zhǔn)工作液：精密吸取上述標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量，加乙腈:水 = 60:40的混合溶液稀釋成 0.05 mg/mL、0.1 mg/mL、0.25 mg/mL、0.5 mg/mL 和 1 mg/mL 的溶液，搖勻后待用。
樣品前處理分別稱(chēng)取月桂酰甘氨酸鉀樣品 1、樣品 2 和樣品 3 各 10 mg，置于 10 mL 量瓶中，向其中加入乙腈:水 = 60:40 的混合溶液，超聲處理 10 min，使其溶解，搖勻，分別得到樣品 1、樣品 2 和樣品3 溶液，待進(jìn)樣分析。
結(jié)果與討論線(xiàn)性關(guān)系取各濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)樣至液相色譜系統(tǒng)，在上述色譜條件下進(jìn)行分析，所得色譜圖如圖 1 所示。圖 1 為各標(biāo)準(zhǔn)工作液重疊圖，月桂酰甘氨酸的響應(yīng)與濃度成正相關(guān)。根據(jù)蒸發(fā)光散射檢測(cè)器的原理，一般采用雙對(duì)數(shù)方式進(jìn)行校準(zhǔn)，即，對(duì)峰面積與濃度分別取對(duì)數(shù)后進(jìn)行線(xiàn)性回歸分析。通過(guò)這種方式得到的校準(zhǔn)曲線(xiàn)如圖 2 所示，且線(xiàn)性回歸方程為log(y) = 1.2536log(x) + 3.9578（其中：y 代表峰面積；x 代表濃度），相關(guān)系數(shù) r = 0.99963。結(jié)果顯示，采用傳統(tǒng)的雙對(duì)數(shù)方式，月桂酰甘氨酸可以獲得良好的線(xiàn)性關(guān)系。由于 Agilent 1290 Infinity II ELSD 是一種采用全新雙 PMT 設(shè)計(jì)的通用型檢測(cè)器，具有較寬的動(dòng)態(tài)范圍（一般可以達(dá)到 103 次方），在低濃度和高濃度下均具有較好的響應(yīng)一致性。因此，本方法還嘗試對(duì)峰面積與濃度進(jìn)行直接線(xiàn)性回歸分析。通過(guò)直接線(xiàn)性校準(zhǔn)所得到的校準(zhǔn)曲線(xiàn)如圖 3 所示，且線(xiàn)性回歸方程為y = 8983.5787x – 424.0423，相關(guān)系數(shù)為 r = 0.99890。結(jié)果顯示，由于1290 Infinity II ELSD 的創(chuàng)新設(shè)計(jì)，月桂酰甘氨酸采用直接線(xiàn)性校準(zhǔn)，也可以獲得良好的線(xiàn)性關(guān)系。