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Agilent LC/MS/MS分離血漿中的膽固醇及相關(guān)固醇類物質(zhì)

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用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 色譜柱和 LC/MS/MS 分離膽固醇及其代謝物以 及多種植物甾醇。通過 12 種固醇類物質(zhì)的分離情況對(duì) InfinityLab Poroshell 120 的兩 種固定相 EC-C18 和 SB-C18 進(jìn)行了比較。InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 色譜柱 對(duì)這些固醇類物質(zhì)的選擇性更好,并且分離度更高。另外還比較了兩種不同粒徑的 InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 填料顆粒。粒徑越小,分離度越高,尤其對(duì)于緊鄰 洗脫的異構(gòu)體,例如 7-烯膽甾烷醇和膽固醇。配備 APCI 的 安捷倫LC/MS/MS 液質(zhì)聯(lián)用可提供出色 的分析靈敏度

膽固醇及相關(guān)化合物(例如膽甾烯醇、 β-谷甾醇、鏈甾醇和 7-烯膽甾烷醇)的分 析可通過 GC 和 LC 實(shí)現(xiàn)。HPLC 技術(shù)在 固醇類物質(zhì)分析領(lǐng)域的應(yīng)用越來越廣泛, 并且常與三重四極桿質(zhì)譜儀聯(lián)用進(jìn)行定量 分析,以提高靈敏度和選擇性。同樣,在 離子化以及離子傳輸進(jìn)入質(zhì)譜儀方面的技 術(shù)改進(jìn)也提高了對(duì)生物基質(zhì)中低濃度代謝 物的檢測(cè)能力。

本方法采用 InfinityLab Poroshell 120 色譜 柱,與全多孔顆粒填料色譜柱相比,其能 在更低的反壓條件下提供更高的柱效和通 量。1.9 µm InfinityLab Poroshell 120 色譜 柱的柱效高。2.7 µm InfinityLab Poroshell 120 色譜柱的反壓低于 600 bar,具有出色 的穩(wěn)定性,并且配備了 2 µm 篩板,降低 了被臟樣品(例如血漿)堵塞的風(fēng)險(xiǎn)。

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