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哺乳動(dòng)物細(xì)胞真核表達(dá)系統(tǒng)是哺乳動(dòng)物細(xì)胞經(jīng)過(guò)翻譯和再加工后產(chǎn)生的外源蛋白，在活性上遠(yuǎn)優(yōu)于原核表達(dá)系統(tǒng)和酵母、昆蟲(chóng)細(xì)胞等真核表達(dá)系統(tǒng)，更接近天然蛋白。哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)可以提供較接近自然狀態(tài)的重組人蛋白的翻譯后修飾。在蛋白質(zhì)表達(dá)過(guò)程中，會(huì)形成接近天然蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)折疊和聚合，具有活性蛋白質(zhì)所必需的空間結(jié)構(gòu)和修飾。
哺乳動(dòng)物細(xì)胞經(jīng)過(guò)翻譯和再加工后產(chǎn)生的外源蛋白比原核表達(dá)系統(tǒng)和真核表達(dá)系統(tǒng)如酵母和昆蟲(chóng)細(xì)胞要好得多，更接近天然蛋白。這一特性使得哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于重組蛋白藥物，特別是治療性重組單克隆抗體藥物的研發(fā)和生產(chǎn)。
哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)是可以指導(dǎo)蛋白質(zhì)的正確折疊，提供復(fù)雜的N-糖基化和準(zhǔn)確的O-糖基化等翻譯后加工功能。因此，表達(dá)產(chǎn)物在分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和生物功能上較接近天然高等生物蛋白分子。自裸DNA*直接轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞以來(lái)的30年間，哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)不僅成為多種基因工程藥物的生產(chǎn)平臺(tái)，而且在發(fā)現(xiàn)新基因和研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能方面發(fā)揮了極其重要的作用。
根據(jù)進(jìn)入宿主細(xì)胞的途徑，表達(dá)載體可分為病毒載體和質(zhì)粒載體。病毒載體是病毒顆粒的形式，通過(guò)病毒包膜蛋白與宿主細(xì)胞膜的相互作用，外源基因進(jìn)入細(xì)胞。常用的病毒載體有腺病毒、腺相關(guān)病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒等。
哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)載體的基本要素包括高活性啟動(dòng)子、轉(zhuǎn)錄終止序列和有效的基因翻譯信號(hào)。需要添加標(biāo)記基因、復(fù)制起點(diǎn)序列和內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)。
幾種常用的表達(dá)重組蛋白的細(xì)胞系包括CHO細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞、COS細(xì)胞和293細(xì)胞。根據(jù)靶蛋白表達(dá)的時(shí)空差異，表達(dá)系統(tǒng)可分為瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)、穩(wěn)定表達(dá)系統(tǒng)和誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)。瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)是指導(dǎo)入表達(dá)載體后宿主細(xì)胞不被選擇性培養(yǎng)，載體DNA隨著細(xì)胞分裂逐漸丟失，目的蛋白表達(dá)時(shí)限短；瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單，實(shí)驗(yàn)周期短。
