貨號: | CM-5047G |
供應(yīng)商: | 上海淳麥 |
數(shù)量: | 1000只 |
英文名: | XL1-BlueChemically Competent Cell |
保質(zhì)期: | 1年 |
保存條件: | 零下80度 |
規(guī)格: | 20*100ul |
Shuffle T7-B 感受態(tài)細胞產(chǎn)品介紹:
Shuffle T7-B菌株為大腸桿菌BL21增強型菌株,為Lon和OmpT蛋白酶缺陷型,適用于T7啟動子啟動的蛋白表達。細胞內(nèi)組成型表達的二硫鍵異構(gòu)酶DsbC不僅有利于表達蛋白形成正確的二硫鍵,并具有分子伴侶的功能,幫助不含二硫鍵的蛋白正確折疊。T7 RNA聚合酶基因整合在細菌染色體上的lac操縱子區(qū)域,基因組中無λ前噬菌體序列,具有抗T1噬菌體感染特點。Shuffle T7-B感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率大于106 cfu/μg DNA。
Shuffle T7-B 感受態(tài)細胞基因型:fhuA2lacZ::T7gene1[lon]ompTahpCgalλatt::pNEB3-r1-cDsbC(SpecRlacIq)ΔtrxBsulA11R(mcr-73::miniTn10-TetS)2 [dcm] R(zgb-210::Tn10 --TetS) endA1 Δgor ?(mcrC-mrr)114::IS10
菌株抗性:對氨芐青霉素,氯霉素,卡那霉素和四環(huán)素敏感,對鏈霉素和壯觀霉素有抗性。
儲存條件:-70℃保存,避免反復凍融。
Shuffle T7-B 感受態(tài)細胞?操作說明:
- 取100μl冰上融化的AngYuBio Rosetta(DE3)感受態(tài)細胞,加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
- 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB),混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT 或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。