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血清/血漿外泌體提取試劑盒

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更新時間:2024-12-24 12:02:41瀏覽次數(shù):991次

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血清/血漿外泌體提取試劑盒  產品簡介:
Exosome(外泌體)是活細胞分泌的直徑約為30-150nm間的膜性囊泡,其天然存在于生物的體液中,包括血液、尿液、唾液、腦脊液、乳液等。

血清/血漿外泌體提取試劑盒 產品簡介:
Exosome(外泌體)是活細胞分泌的直徑約為30-150nm間的膜性囊泡,其天然存在于生物的體液中,包括血液、尿液、唾液、腦脊液、乳液等。Exosome中攜帶有細胞溶質蛋白、smRNA、各種代謝酶等,參與各種細胞功能調控,有望成為多種疾病的早期診斷標志物。近期的研究發(fā)現(xiàn)外泌體還可以運輸核酸,參與細胞間通訊,參與細胞間的物質交換和信息交流,影響細胞的生理狀態(tài),并與多種疾病的發(fā)生與進程密切相關。Exosome在藥物載體運輸,腫瘤生物學和基因調控研究等方向已經成為研究熱點。
本公司Exosome Isolation Regent用于高效、快速、方便的從血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織液中體取exosome的試劑盒。僅需通過簡單操作和常規(guī)離心機即可從樣本內中獲取大量結構完整的exosome。相比傳統(tǒng)的超速離心法,Exosome Isolation Regent提取效率更高,更節(jié)省時間和樣本,提取的exosome可用于Western Bloting、qPCR、功能驗證、Elisa等后續(xù)實驗。

血清/血漿外泌體提取試劑盒試劑盒適用范圍:
本試劑盒只適用于血清或血漿的外泌體提取,僅用于科學研究。

■試劑組分:


■保存條件:
請于4°C保存,可穩(wěn)定保存一年。(可常溫運輸)

■流程介紹:
樣品預處理→沉淀外泌體→外泌體重懸→外泌體純化

血清/血漿外泌體提取試劑盒樣品準備:
血清/血漿:
1凍存樣品,室溫或25℃水浴解凍,將*融化的樣品置于冰上;新鮮樣品,收集樣品后置于冰上,2000 g離心10 min, 以除去殘留細胞;
2 收集上清液,10000g離心10 min, 以除去細胞碎片;
3 收集上清液提取exosome或4°C保存。
注:如需進行下游核酸(DNA或RNA)相關實驗,建議樣品量不低于300 μl。

■ Exosomes提?。?/span>
(1)取300 μl上清液至新的離心管中,加入體積比為1:1的Exosome Isolation Regent A液;
(2)顛倒混勻3-5次后于4°C靜置5 min后 10000g 離心2 min;
(3)取上清液轉移置新的離心管中,加入體積比為1:1的Exosome Isolation Regent B液;
(4)顛倒混勻3-5次后于4°C靜置1h-2h后 13500 g 離心30 min后棄去上清液;收集沉淀,此沉淀即為外泌體;
(5)根據(jù)后續(xù)實驗加入100-200µl Exosome Isolation Regent C重懸沉淀物,進行后續(xù)實驗或-80°C保存(由于沉淀物的粘性較大,因此加入Exosome Isolation Regent C后室溫放置約15 min,用移液器吹打后沉淀物會自然溶解)。
注意:如對提取效率有要求,可適時延長離心時間10-30 min,總長不超過1h。

■ 常見問題:
Q1:提取的外泌體如何保存?
A1:外泌體可在2-8℃保存一周,若需長時間保存,建議放置于-80℃冰箱凍存,避免反復凍融。
Q2:如何鑒定提取的外泌體?
A2:外泌體是體細胞分泌的細胞外囊泡群體中一種,直徑一般為30-150nm,通常確定外泌體一般需要三個條件:透射電鏡(TEM)形態(tài)觀察,顆粒粒徑測定(NTA)和蛋白標志物檢測(外泌體標志蛋白有CD9、CD81、CD63、Alix、TSG101 等)。
Q3:將Exosome Isolation Reagent加入到體液樣本中后,顛倒混合。請問這一步是否可以用振蕩器劇烈震會對效果有影響?
A3:只需將Exosome Isolation與待提取樣品混合均勻即可,震蕩的強度不宜過分劇烈,劇烈震蕩會影響提取效果。
Q4:與超速離心方法相比本試劑盒提取外泌體方法有哪些優(yōu)勢?
A4:本試劑盒具有操作簡單,便捷,提取效率高,可達90%以上,不需要額外儀器設備,可小體積樣本提取等特點。

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