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當前位置：> 供求商機> 細胞活力檢測
貨物所在地：上海上海市
更新時間：2024-12-16 21:00:08
有效期：2024年12月16日 -- 2025年6月16日
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MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，化學名稱： 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽，商品名：噻唑藍。是一種黃顏色的染料。MTT比色法，是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。在一定細胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結晶形成的量與細胞數(shù)成正比。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚，用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數(shù)量。
操作步驟
1.收集對數(shù)期細胞，調(diào)整細胞懸液濃度，每孔加入100ul,鋪板使待測細胞調(diào)密度1000- 10000 /孔。
2.一定條件培養(yǎng)細胞適當時間，至細胞單層鋪滿96孔平底板,加入濃度梯度的藥物。
3.適當條件培養(yǎng)適當時間，倒置顯微鏡下觀察。
4.每孔加入10ul MTT溶液，繼續(xù)培養(yǎng)1-4h。若藥物與MTT能夠反應，可先離心后棄去培養(yǎng)液，小心用PBS沖2-3遍后，再加入含MTT的培養(yǎng)液。
5.終止培養(yǎng)，小心吸去孔內(nèi)培養(yǎng)液。
6.每孔加入100ul二甲基亞砜，置搖床上低速振蕩10min，使結晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀OD490nm處測量各孔的吸光值。
活力計算：
細胞活力（％）=[A(加藥)-A（空白）]/[A（0加藥）-A（空白）]×100
A（加藥）：具有細胞、MTT溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A（空白）：具有培養(yǎng)基和MTT溶液而沒有細胞的孔的吸光度
A（0加藥）：具有細胞、MTT溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
細胞活力：細胞增殖活力或細胞毒性活力
應用范圍
1.抗腫瘤藥物篩選
2.細胞毒性試驗
3.腫瘤放射敏感性測定
服務期限
1-2周。
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