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PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞（通過STR） 細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時， 棄 25cm2 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)
液， 用 PBS 清洗細(xì)胞一次； 添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中， 倒置顯微鏡下觀察， 待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml *培養(yǎng)液終止消化， 再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落， 然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中， 1000rpm 離心5min。

產(chǎn)品名稱
PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞
（ Cat.No： XK-Y4012）
適用范圍
本產(chǎn)品*于科學(xué)研究， 絕不可
作為人類或者動物疾病的治療產(chǎn)品使
用。
*培養(yǎng)基配置
DMEM（ 高糖） +10%FBS+1% P/S
細(xì)胞圖片

細(xì)胞傳代
1. 細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時， 棄 25cm2 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)
液， 用 PBS 清洗細(xì)胞一次；
2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中， 倒置顯微鏡下觀
察， 待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml *培養(yǎng)液終止消化， 再輕輕吹打
細(xì)胞使之脫落， 然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中， 1000rpm 離心
5min；
3. 棄上清， 沉淀細(xì)胞用 1-2ml *培養(yǎng)基重懸， 然后按 1:2 比例進(jìn)
行分瓶傳代， 最后放入 37℃ ， 5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
細(xì)胞復(fù)蘇
1. 從液氮中取出細(xì)胞凍存管（ 注意： 佩戴防爆管面具） ， 快速將其
置入 37℃ 水浴中解凍， 直至凍存管中無結(jié)晶， 然后用 75%的酒精擦
拭凍存管外壁；
2. 將凍存管中的細(xì)胞移至含 6ml *培養(yǎng)基的 15ml 離心管中，
1000rpm 離心 5min；
2. 棄上清， 沉淀用 6ml *培養(yǎng)基重懸， 接種 25cm2培養(yǎng)瓶， 于 37℃ ，
5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4. 第二天， 換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存
1. 細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時， 棄 25cm2 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)
液， 用 PBS 清洗細(xì)胞一次；
2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中， 倒置顯微鏡下觀
察， 待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化， 輕輕吹打細(xì)胞使
之脫落， 然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中， 1000rpm 離心 5min；
3. 用適量的凍存液（ FBS： DMSO=9 ： 1） 重懸細(xì)胞， 并放置于凍
存管中；
4. 先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h， 然后將其移入-80℃ 過夜， 24h
后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。 使用程序降溫盒可直接放入-80℃ 。

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KG-1	人急性骨髓性白血病細(xì)胞
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