詳細(xì)介紹
雞瘦素(LEP)一步法ELISA試劑盒
?產(chǎn)品信息
【用途】
該試劑盒采用“一步"夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞或其他相關(guān)生物液體中LEP濃度。
【檢測(cè)原理】
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體,將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。
【特異性】
可檢測(cè)樣本中的LEP, 且與其它類(lèi)似物無(wú)明顯交叉反應(yīng)。
【重復(fù)性】
板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%
【批內(nèi)差】
取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
【批間差】
選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本定量測(cè)定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
【精密度】
精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%)=SD/mean×100 CV<10% Inter-批間差: CV<13%
【穩(wěn)定性】
經(jīng)測(cè)定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。 為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響,實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來(lái)進(jìn)行操作可減少人為誤差。
雞瘦素(LEP)一步法ELISA試劑盒之ELISA常見(jiàn)問(wèn)題
引起溶血的原因:
1)由于抽血困難,采血時(shí)定位進(jìn)針不準(zhǔn)、針尖在血管中探來(lái)探去造成血腫等而發(fā)生溶血。
2)注射器和針頭連接不緊,采血時(shí)空氣進(jìn)入,或患者(動(dòng)物)緊張導(dǎo)致血流不暢,抽血時(shí)間過(guò)長(zhǎng),都會(huì)導(dǎo)致血標(biāo)本中混有泡沫,這種混有泡沫的血標(biāo)本,放置一定時(shí)間后泡沫polie或迅速干燥,造成血細(xì)胞破壞而發(fā)生溶血。
3)血標(biāo)本在運(yùn)輸過(guò)程中(或離心前)過(guò)度振蕩或儲(chǔ)存不當(dāng)。
4)不合格的塑料制品會(huì)因聚合不*而具有毒性,這種毒性可造成溶血。
5)試管質(zhì)量粗糙。
6)抽血消毒時(shí),酒精未干就進(jìn)行抽血。
7)操作過(guò)程中,可能引入的動(dòng)物的毛發(fā),而導(dǎo)致溶血。
8)盡量不要收集注射器推到最后的血,也不要使勁擠壓注射器。