使用重組表達(dá)的E1、E2、E3酶與底物蛋白，結(jié)合ATP、泛素分子進(jìn)行反應(yīng)，通過(guò)Western Blot檢測(cè)底物泛素化水平?26。

常用試劑盒（如Ubiquitinylation Kit）可標(biāo)準(zhǔn)化操作流程?7。

在細(xì)胞中過(guò)表達(dá)泛素、E3連接酶及底物蛋白，利用蛋白酶體抑制劑（如MG132）阻斷降解，通過(guò)免疫共沉淀（Co-IP）富集目標(biāo)蛋白后檢測(cè)泛素化信號(hào)?26。

：通過(guò)富集泛素化肽段，結(jié)合高分辨率質(zhì)譜確定具體修飾位點(diǎn)?45。

：基于生物信息學(xué)預(yù)測(cè)（如UbiNet、GPS-Uber等工具），對(duì)潛在賴氨酸位點(diǎn)進(jìn)行突變后觀察泛素化水平變化?47。